应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于内参
51/1返回列表
查看: 1332  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

7788945

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于内参

想验证一个应该在根部特异性表达的基因在茎和叶中是否有表达，提取了RNA，OD测定260/280 1.8, 260/230 1.28，结果虽然不好但是不愿意再提了，太墨迹，就拿这个反转了，用β-actin做引物试了一下有带，就拿这个模板去P了。跑完一看以为不表达的目的基因跑出来了，原本想用来做阳性对照的β-actin却没跑出来，这是怎么回事呢？主要不懂为什么同样的条件下原本能出的β-actin不出，体系和退火温度是完全一样的，加进去的模板量也是一样的。
另外那位大侠指点一下260/230 值如果过低，像1.28这样的结果会对反转产生一些什么样的影响？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-03-07 16:11:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqj1988926

金虫 (正式写手)
就是内参的pcr 条件，最有可能是退火温度需要改变一下
赞一下 回复此楼
9楼2011-03-09 08:31:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

shihongling

金虫 (小有名气)
7788945(金币+1): 2011-03-07 16:56:28
引用回帖:
Originally posted by 7788945 at 2011-03-07 16:11:01:
想验证一个应该在根部特异性表达的基因在茎和叶中是否有表达，提取了RNA，OD测定260/280 1.8, 260/230 1.28，结果虽然不好但是不愿意再提了，太墨迹，就拿这个反转了，用β-actin做引物试了一下有带，就拿这个模板 ...

同问！顶！
回复此楼
2楼2011-03-07 16:35:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cjl2fl

金虫 (正式写手)
★
7788945(金币+1):谢谢参与
7788945(金币+1): 2011-03-09 09:40:34
不同的组织，引物有差异的吧。。。
是不是对照的问题？
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-03-07 17:13:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

7788945

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by cjl2fl at 2011-03-07 17:13:09:
不同的组织，引物有差异的吧。。。
是不是对照的问题？

不是组织的毛病，问题是前一次能P出来的内参到了第二次P不出来，用的模板、体系、退火温度等条件都一样，第二次没有，不是说这个内参在别的组织里没有
赞一下 回复此楼
4楼2011-03-08 15:59:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
[考博] 招收博士1-2人 +3 QGZDSYS 2026-03-18 3/150 2026-03-20 11:58 by 呱呱呱呱叫
[考研] 317求调剂 +4 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 11:08 by 申子申申
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分，一志愿四川大学，诚心求调剂 +6 吃吃吃才有意义 2026-03-19 6/300 2026-03-20 10:47 by 尽舜尧1
[考研] 271材料工程求调剂 +7 .6lL 2026-03-18 7/350 2026-03-20 09:10 by xingguangj
[考研] 307求调剂 +9 冷笙123 2026-03-17 9/450 2026-03-19 22:44 by 学员8dgXkO
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +14 陌の森林 2026-03-18 14/700 2026-03-19 22:38 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-19 3/150 2026-03-19 13:36 by houyaoxu
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 0703化学 305求调剂 +4 FY_yy 2026-03-14 4/200 2026-03-19 05:54 by anny19840123
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +10 秋有木北 2026-03-14 10/500 2026-03-19 05:52 by anny19840123
[考研] 328求调剂，英语六级551，有科研经历 +3 生物工程调剂 2026-03-17 7/350 2026-03-18 20:41 by Wangjingyue
[考研] 311求调剂 +11 冬十三 2026-03-15 12/600 2026-03-18 14:36 by 星空星月
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[考研] 299求调剂 +5 △小透明* 2026-03-17 5/250 2026-03-18 11:49 by 尽舜尧1
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿南京大学，080500材料科学与工程，调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 274求调剂 +5 时间点 2026-03-13 5/250 2026-03-17 07:34 by 热情沙漠
[考研] 机械专硕325，寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 080500，材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭