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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于内参
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7788945

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于内参

想验证一个应该在根部特异性表达的基因在茎和叶中是否有表达，提取了RNA，OD测定260/280 1.8, 260/230 1.28，结果虽然不好但是不愿意再提了，太墨迹，就拿这个反转了，用β-actin做引物试了一下有带，就拿这个模板去P了。跑完一看以为不表达的目的基因跑出来了，原本想用来做阳性对照的β-actin却没跑出来，这是怎么回事呢？主要不懂为什么同样的条件下原本能出的β-actin不出，体系和退火温度是完全一样的，加进去的模板量也是一样的。
另外那位大侠指点一下260/230 值如果过低，像1.28这样的结果会对反转产生一些什么样的影响？
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1楼 2011-03-07 16:11:01
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wqj1988926

金虫 (正式写手)
★
7788945(金币+1):谢谢参与
7788945(金币+1): 2011-03-09 09:40:51
内参可能需要另外的条件吧
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6楼2011-03-08 17:25:10
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wqj1988926

金虫 (正式写手)
就是内参的pcr 条件，最有可能是退火温度需要改变一下
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9楼2011-03-09 08:31:41
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