| 查看: 1384 | 回复: 3 | ||
[求助]
半定量PCR内参 已有2人参与
|
| 做半定量PCR，提RNA反转录成cDNA后扩actin，带非常亮。扩目的基因带时有两条带，经比对后鉴定大的那条是基因组带，小的那条是cDNA带，大小吻合，说明提RNA过程中有DNA未消化干净，cDNA中混有DNA污染。鉴于样本比较多，重新提RNA较麻烦，想了一个办法，请各位虫友帮忙看是否可行。本实验室所用内参为actin2，想在设计actin引物时设计两条跨内含子的引物，j基因组带比cDNA带要长将近200bp, 这样扩actin 的时候就会有两条带，一条基因组带，一条cDNA带。然后我只将cDNA带的亮度调一致，可以认为这就是总cDNA的内参吗？大家觉得可以吗？ |
回复此楼» 猜你喜欢
怎么查看固定段11位
已经有5人回复
-
可以准确的通过filecode判断基金中还是不中。
已经有15人回复
-
植物学论文润色/翻译怎么收费?
已经有113人回复
-
感觉普通人已经没办法玩了，躺平是唯一的出路。
已经有26人回复
-
江苏省优青门槛
已经有20人回复
-
心好累。今年我们部门提交了18个项目。中了11了，可惜我的又挂了
已经有10人回复
-
面上项目计划书
已经有7人回复
-
面上项目计划书附件
已经有9人回复
-
面上项目计划书系统状态
已经有18人回复
-
NSFC-UNEP（与联合国环境规划署）合作项目
已经有33人回复
-
和伊朗人合作
已经有32人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助关于WB的内参问题
已经有3人回复
- 反转录的cDNA没问题，但是实时定量PCR却不行。内参扩不出来啊。
已经有8人回复
- PCR 扩增条带大小不对
已经有10人回复
- 急求荧光实时定量PCR内参法实验步骤，最好能给我一篇详细点的论文
已经有14人回复
- 做荧光定量PCR,如果对照组的目的基因不表达,在采用2-△△Ct时怎么处理数据
已经有6人回复
- 半定量 内参条带不一致
已经有4人回复
- 请问用Western做co-ip，内参要如何设置，内参是必须的吗？
已经有3人回复
- 荧光定量pcr,以及内参基因的选择。
已经有4人回复
- 使用多对引物进行实时定量PCR后未得到实验结果，是否能说明目的基因不表达？
已经有10人回复
- 求助荧光定量PCR统计方法
已经有7人回复
- qRTPCR内参基因是不是每次都要做
已经有10人回复
- 相对定量内参基因循环数的问题
已经有18人回复
- Realtime PCR 内参与目的基因问题
已经有11人回复
- 内参引物和目的基因的引物可以放在同一个PCR管中反应吗？？
已经有5人回复
- 半定量内参条带的亮度不一样，各位大侠怎么办？？？急呀！！！！！
已经有22人回复
- 【求助】WB中，核蛋白内参和总蛋白内参的问题
已经有12人回复
- 【求助/交流】pcr条带不亮
已经有6人回复
- 【求助/交流】实时定量内参无条带！
已经有7人回复
- 【求助/交流】做实时定量PCR需要校正内参吗？
已经有9人回复
- 【软件】定量PCR内参基因选择软件geNorm
已经有93人回复
- 【求助/交流】RT-PCR ，内参在哪个步骤添加以及marker何时使用及确定？谢谢
已经有14人回复
- 【求助/交流】实时定量PCR选择内参？
已经有3人回复
- 【求助/交流】关于pcr内参b-actine的一个问题
已经有5人回复
- 半定量PCR的详细步骤
已经有7人回复
lvbobo823
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 363 (硕士)
- 金币: 7752.3
- 散金: 15
- 红花: 9
- 帖子: 751
- 在线: 188.2小时
- 虫号: 819723
- 注册: 2009-07-31
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
2楼2014-01-13 21:51:02
3楼2014-01-13 22:36:36
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
4楼2014-01-13 23:58:58