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半定量PCR内参 已有2人参与
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| 做半定量PCR，提RNA反转录成cDNA后扩actin，带非常亮。扩目的基因带时有两条带，经比对后鉴定大的那条是基因组带，小的那条是cDNA带，大小吻合，说明提RNA过程中有DNA未消化干净，cDNA中混有DNA污染。鉴于样本比较多，重新提RNA较麻烦，想了一个办法，请各位虫友帮忙看是否可行。本实验室所用内参为actin2，想在设计actin引物时设计两条跨内含子的引物，j基因组带比cDNA带要长将近200bp, 这样扩actin 的时候就会有两条带，一条基因组带，一条cDNA带。然后我只将cDNA带的亮度调一致，可以认为这就是总cDNA的内参吗？大家觉得可以吗？ |
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lvbobo823
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