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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】cDNA电泳图
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飘在海上的雪

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】cDNA电泳图已有9人参与

各位虫虫，你们有没有跑过cDNA电泳，我跑的是这个样子，你们呢？
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不在沉默中爆发，就在沉默着死亡！
1楼2010-10-22 09:29:44
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virus2009

金虫 (正式写手)

人称 龙哥
★
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不明白楼主为什么要把cDNA电泳？直接pcr不好吗？
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virus
2楼2010-10-22 09:38:50
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飘在海上的雪

木虫 (正式写手)
dhd997:建议引用回复，方便虫友交流。 2010-10-22 09:47:40
我想知道cDNA该是什么样的电泳图。
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不在沉默中爆发，就在沉默着死亡！
3楼2010-10-22 09:46:20
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月月大可

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2):鼓励交流！ 2010-10-22 20:27:26
cDNA是由mRNA反转的来的，一般的生物体中mRNA的含量在5%左右，你拿全RNA去跑胶效果好的也就是能看到一些弥散，看不到具体的条带。
再反转成cDNA，本身一次就20微升，我是舍不得去跑胶。我也不太认为能看到具体的条带。
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4楼2010-10-22 12:39:05
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linxi8579

铜虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我没有跑过，不过楼主的想法真的挺好的。但是cDNA不会有这么明显的带吧，反转出来的cDNA的大小可能也是不都一样的，在真核生物里。
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5楼2010-10-22 15:28:57
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jasco

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
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scelab:jasco的仪器现在不多用了啊 2010-10-22 21:46:35
scelab(金币+2):谢谢交流 2010-10-22 21:46:55
看看
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6楼2010-10-22 15:38:11
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zgw1016

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
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scelab(金币+1):谢谢交流 2010-10-22 21:46:49
cDNA不用跑电泳图的吧！这个cDNA模板浓度本来就比较低，长短也不一的，用引物跑PCR看看有没有目的条带的。
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7楼2010-10-22 21:02:42
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斯多格格

铜虫 (小有名气)
★
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我是建库用的，建库时反转试剂比较贵，结果cDNA没有扩增出来，想看看有没有反转成功，就跑了个胶，用的是随机引物，但是弥散条带所在位置显示它很小，貌似不能用啊······
2012.11.23-2.jpg(15.68KB)
http://kuai.xunlei.com/d/GCVOTHBWCDUH?p=130497
2012.11.23-2.jpg(15.68KB)
http://kuai.xunlei.com/d/GCVOTHBWCDUH?p=130497
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书自香我何须花
8楼2012-11-23 19:08:10
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yyll1988

银虫 (正式写手)
★
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刚开始跑过一次。用的是oligodt反转的，条带比较弥散。胶浓度低，跑的时间短还能看见 时间越长越看不见
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9楼2012-11-23 19:29:23
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huanghy346

铁虫 (初入文坛)
★
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引用回帖:
6楼: Originally posted by jasco at 2010-10-22 15:38:11
看看
http://pic.muchong.com/201010/22/287776_153746.jpg

这是正确的图片吗？我的也是这样子的，我是第一次做反转录，所以一切都不懂。
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10楼2014-01-16 18:58:28
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