24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 922  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yinsongna

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于PCR已有3人参与

最近做重叠延伸PCR,是分六段合,标号为1,2,3,4,5,6,P出这六段后,两两合成都可以,1+2,3+4,5+6,也都P的出来,而且杂带也不多,我就直接拿pCR产物继续P了,但是再往后加就怎么也出不来了,原来怀疑是引物的问题,重新设计引物之后,还是老样子,P出来的东西跑电泳就是白花花的一片,这个PCR做了快一个月了  要是做出来了就可以回家了  伤啊 哪位高人解决一下吧
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yinsongna

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-08-04 15:56:42:
恐怕是后来加的引物和前面的引物,存在非常稳定的二聚体,放到一起检测一下

怎么检测啊
4楼2010-08-04 17:37:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

yujiaping1

木虫 (著名写手)

yinsongna(金币+1): 2010-08-04 17:37:10
恐怕是后来加的引物和前面的引物,存在非常稳定的二聚体,放到一起检测一下
3楼2010-08-04 15:56:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)


amisking(金币+1):欢迎交流! 2010-08-04 20:42:49
引用回帖:
Originally posted by yinsongna at 2010-08-04 17:37:20:

怎么检测啊

用软件检测,引物设计软件
笨办法把这些序列人为的都放一起,设计引物,不就能检测了
不过应该有能检测引物二聚体的软件,就是我也不知道

[ Last edited by yujiaping1 on 2010-8-4 at 18:05 ]
6楼2010-08-04 18:03:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yinsongna

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by zj408694018 at 2010-08-04 17:54:32:
回收之后再P吧

回收与不回收的区别在哪儿呢  拿PCR产物做模板不至于什么都P不出来啊
7楼2010-08-04 19:32:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见