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求研究抗生素抗性基因的小伙伴

牵着鬼散步

希望能和课题方向与抗生素抗性基因有关的小伙伴多交流交流，作为一个专业是化学的老板的开门弟子，木有师兄师姐带，课题也是自己设计，实验开展十分困难，首先在哪儿采样就是一个大难题，不知道环境中含有抗性的菌多不多，也不知道我要的抗性基因P不P得出来，求高人指点,,?^...

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pUT mini-Tn5 Km质粒构建突变库，质粒哪部分序列将插入到基因组中？

pUTmini-Tn5Km质粒构建突变库，质粒哪部分序列将插入到目的菌株基因组里面的呢？表示有点懵，求指教#^_^#

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放线菌显微镜形态鉴定

40倍光学显微镜观察，菌丝很少，各位前辈指点，这个是放线菌和它的孢子吗？谢谢

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乳酸菌液体能保活吗？

乳酸菌中的屎肠球菌耐受性相对较好作为益生菌离心干燥很麻烦，有没有直接发酵液能保活的，如能，放37度存放，一个月能存活多少？

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求助权威的生物化学书

现在是研一，一些基础知识老是忘掉，想买一本生物化学书放在身边翻一翻，求推荐那种权威一点的，结构清晰的书

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求教罗伊氏乳杆菌发酵相关知识

就是目前在做罗伊氏乳杆菌的工艺，用的培养基是乳糖做碳源。大豆蛋白胨做的氮源，上发酵罐培养，如果是100rpm培养当ph到5.0时会大量产气，最后放罐的活菌数就5亿左右，还没有三级种子多。（10亿）后来又试了下静态培养，产的气体会在发酵液里面不会大量逸出。活菌数...

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CFU代表细菌群落数量

小白求教。。。这个是靠自己肉眼数出来的？会不会有误差？

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如何进行食用菌的稀释分离，纯化培养

我的操作是将试管菌种(以金针菇菌种为例)挑入无菌水中进行摇荡稀释，然后在PDA平板上做涂布同时也有做平板划线培养，放入培养箱两三天没啥反应。。因为菌种扩培多代了，目的想说进行稀释分离，选取得到更纯更有活力的菌种。。在这个操作上有点不知道怎么进行，有大神指点一下...

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微生物高密度发酵

微生物发酵若是为了获取更多的菌体细胞，是否可以通过把培养基浓度增大十倍或更大来达到这样的目的，这对细胞的代谢或者性能会有影响吗？大佬们求分享经验

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想求一株荧光标记的金黄色葡萄球菌

我想买一株荧光标记的金黄色葡萄球菌(表达荧光蛋白，可用荧光显微镜观察到菌体发荧光)，请问大家有木有购买途径，或者求一株，谢谢。

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光合细菌培养微氧才会变红，要不就是黄色，这个是什么原因呢？

遇到这个菌种，不用石蜡封口就像右边的红色，封口了，就像左边的偏黄色一点不红，这个什么原因呢？用的图上的分离培养基。

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种子罐培养基中添加的AF是什么东西

如题，在种子罐培养基的配方中，添加的af是什么东西？谢谢[Lasteditedbyanicca5105on2019-10-9at06:59]

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求助一下细菌培养筛选测序的事情

大家好，这里纯新人小白一个是在做小课题的本科生。目前在做土壤根际细菌的筛选，目的是筛选出新菌株或者有价值的菌株。然后现在纯化完以后，实验室的师兄说可以送去公司测序，给菌液就行了。请问一下大家菌液是指怎么样的？要怎么制备？以及能大概说一下送公司测序的流程，得到的...

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乳杆菌的培养条件

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我养肠道杆菌缺一个都没有出现，都是球菌甚至还有马链球菌出现，请大家指教你们都是怎么养的

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菌株购买ATCC17100

来道微生物

实验需要，各位大佬，有此菌株的，希望可以购买，价格合理，周期短一点。可以私信我。截止于10月底。

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大肠杆菌诱导后自溶

大肠杆菌W3110，37℃生长至OD70，降温30℃，加IPTG，诱导8-10小时起泡溶菌，只是一部分溶，慢慢大部分溶。氨水耗得较多。求指导下，如何缓解这现象，表达的酶无毒性。可以排除噬菌体和染菌。感激涕零！！！

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显微镜相关问题

显微镜在观察玻片内孢子时，会有重影，是什么原因，重影中也有需要的孢子

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测定发酵液中的残糖量

按理说配好的培养基里的葡萄糖，加入菌液后应该降糖，为什么发酵后测定的残糖量浓度比初始的高呢？有大神能告诉我哪块出问题了吗？谢谢了各位！

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酶活的测定方法

那位虫友帮忙分享下蛋白酶，淀粉酶，脂肪酶和纤维素酶活活的测定方法，跪谢了！

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胞外聚合物（EPS）吸附染料实验

求你做个人吧

按照文章里的步骤提取了EPS并且冷冻干燥得到了EPS粉末，但是加入到染料溶液里的时候发现对染料丝毫没有吸附作用，求各位前辈指教，感激不尽！（EPS提取方法为加异丙醇离心）

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pCas和pTargetF质粒用于基因编辑

pCas和pTargetF质粒用于大肠杆菌基因编辑时，前面各项步骤都没有问题，最后一步菌落PCR验证敲除菌株时，总是得不到想要的大小条带，望做过这类实验的童靴可以提供一些建议。

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淀粉，纤维素酶水解圈

一般水解圈菌落比例多大算效果好？

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从环境样品中提取和培养微生物

水样/沉积物样品中提取微生物群落，有没有标准方法？用双层滤膜（不同孔径）滤出细菌吗？另：微生物提取出来之后可以放在滤纸上置于-80冰箱长期保存吗？（需要培养筛选的时候拿出来活化扩培筛选）初做实验，肯定各位大神指教！感谢！

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pET28a蛋白表达

用0.4mmol/l的IPTG16度诱导过夜，蛋白都以包涵体的形式存在，为了增加蛋白的可溶性，有没有人有好的建议

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希瓦氏MR-1菌种子液好氧条件下为什么只能长到0.3左右

第一次培养：从-80中取出菌种，然后平板涂布，约14h后，挑单菌落于5ml的Lb液体培养基，分别在12，16，20h测定OD600，均没有超过0.4第二次从-20中取出菌种，直接以1:100比例接入5ml的Lb液体培养基，分别在6，7，19h后测OD600，均...

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孢子粉怎么稀释呢

准备用孢子粉制备孢子悬浮液，但是倒入生理盐水中浮在表面了不溶解怎么办？

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筛出来的菌株在固体培养基生长在液体培养基长不出来

最近通过活性污泥，在以某种特定污染物为唯一碳源的基础培养基的选择平板中分离得到了一降解菌，菌株在固体平板中生长良好，但转接到液体培养基（配方和固体培养基一致）中摇床培养却摇不起来。摇床培养温度、转速都没问题，还请各位大神帮忙分析下可能的原因及解决办法。谢谢大家...

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大肠杆菌平板计数，涂板不长菌

目前在做大肠杆菌平板计数实验，原菌液测Abs=0.8，可是稀释一系列梯度后，将溶液混匀取100uL涂板，37℃孵育后不见长菌，请问是什么原因呢？（用灭菌的0.9%氯化钠稀释）

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实时荧光PCR投刊问题

各位虫友，现在实时荧光定量PCR方法的建立到实际应用的实验，能发SCI吗？低影响因子（3-4区）的就行。有的话，能不能推荐一下

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急求助篮状菌属菌株的分子鉴定通用引物

各位虫友，手里有一株篮状菌，通过ITS1和ITS4不能准确鉴定到种，查询资料说可以用真菌的18S通用引物，找到有NS1和fung，NS1和NS4，NS1和NS8，这些通用引物，想问问哪一对比较适合用于篮状菌属的鉴定，或者有没有专门用于篮状菌属菌株的通用引物埃希...

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