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DNA测序序列比对

best1choice
楼主跟随导师做毕业论文实验,进展到DNA测序结果比对分析,但因大学所学知识有限,此内容没有接触到,所以有很多不明白,很迷茫,想问一下DNA测序结果该怎么分析?
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提取微生物DNA,DNA断裂的问题

杜仲君
请各位大神帮我分析一下原因,最近用CTAB法提取微生物DNA,多次提取,但是DNA总是断裂为两段,虽然枪头、Ep管、试剂等都灭过菌,但会不会存在偶然情况使试剂或者Ep管中存在水解酶?或者其他的原因?如何修正?(1-4泳道为同一株菌,新手金币略少勿怪,谢谢。)
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毕赤酵母表达体系

enjoy大志
不知哪位大神手里有毕赤酵母质粒:pPIC3.5K、pPIC9K或者PAO8.5毕赤酵母宿主菌株:GS115和KM71本人可以用别的质粒或者菌株来进行交换还望哪位大神帮助,万分感谢
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请问ncbi上有complete cda的序列都是已经克隆验证过的么

kongkong0223
请问ncbi上有complete cda的序列都是已经克隆验证过的么
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挑单菌落,通常多长时间能出现浑浊?

就是柚子啊!
DH5α,挑的单菌落,摇了三个小时了!还是很清!一丝丝都看不到?请问下!出现稍微的浑浊的多长时间。没有经验,求教
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分子生物学、蛋白表达

吐司布丁7
求助各位大神,最近用BL21表达pET系列重组质粒,用溶菌酶破碎细菌,但是离心之后,SDS-PAGE电泳结果显示上清没有蛋白条带,沉淀里有,课题组的师兄师姐的又没有问题,这是什么情况啊?感谢各位的指点
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抗生素的耐热性

聪明的胖子
氨苄抗生素在121℃下会不会失活不
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关于蛋白洗涤过程中出现变性的问题

LMN2012
最近,利用大肠杆菌系统表达了一个50多KDa的蛋白,通过对超声后的上清和沉淀分别进行电泳发现,目标蛋白绝大多数都在沉淀中,怀疑是包涵体形式表达,可是利用实验室常用的包涵体清洗液ph9.5(氯化钠,edta,tris,tritonx-100,尿素)对沉淀进行洗涤...
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RNA提取结果没有很明显的两条带,是什么原因呢

洋小妞baby
植物叶片RNA提取结果如图,左边的marker,右边是样品,请问一下RNA这样是降解了吗
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请问有会生信的同学吗?

meZXJ
请问有会生信的同学吗?
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无活性可溶表达

吐司布丁7
最近成功做了可溶性表达,但是全菌进行底物反应后,跑气相,发现没有活性,请问大神们,怎么破?
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5'粘性末端的片段加A尾,做TA克隆

rrrhm
最近拿有一个天然质粒,用三种酶随机切,切了之后跑胶确定被酶切成了不同的片段。之后要做TA克隆,想给片段加A尾。因为我用的酶切出来之后都是带有5\'突出末端,所以想知道,要是加A尾的话,是不是直接用TAQ酶加A尾就行了呢?因为taq酶具有5\'-3\'的聚合酶活...
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高gc含量,3kb片段,电泳无果

爷爷作呕
用的金唯智的高保真酶,扩增不出来片段。用mix能扩增出来,但杂带很多。第一张图都是高保真酶扩增的,有带无带引物设计不同。没加gc或Dmso,第二张图是mix扩增的梯度,有带很亮。我的目的是想用高保真酶扩增出单一的条带,或者非特异性条带很少的那种
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多重PCR-测序相关问题

麦麦是条鱼
做某一植物的snp分型,先用多重p出来,然后再用二代测序的方法去测序,每株植物是n个位点,没个位点差不多200bp左右,现在n对引物已经拿到了,但是这个多重体系是怎么配比的,反应的流程是什么,求大神解答啊?在线等!金币比较少,望理解!
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fastapfu和taq酶做菌落pcr

yuevis
之前的片段是用fastpfu,退火温度52扩增的,转化大肠之后,用taq酶做菌落pcr,挑了所有的白色菌落都没有条带,怀疑是退火温度和变性时间的问题,修改之后,变性时间改成5min,退火温度试了55,52都没有条带,请问这是怎么回事啊?如何解决啊,不可能是所有...
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taq加尾,TA连接

yuevis
请问我用taq酶对胶回收的片段进行加尾,再与T载体相连,加尾后直接取体系里的反应液与载体相连还是要对加尾后的体系进行纯化再相连?
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RACE测不到两端

杨惠源
目前在做两个基因的RACE。我是克隆完送的测序,根据预测结果能看得出一个基因的3’端还差十多bp没到终止密码子就开始出现AAAAAAAAA和接头引物了,,,另一个基因5’PACE也出现这种问题,还差大概20bp不到头就出现GGGGGGGG接头引物序列了。一开始...
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请设计实验,探明A和B的关系,求助

kaner1023
二、在植物学研究过程中,发现A基因和B基因突变都引起某一表型,请设计实验,探明A和B的关系。求助求助
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前期转录谱研究发现,在病原侵染后,拟南芥A基因表达大量上调,...

小男coco
前期转录谱研究发现,在病原侵染后,拟南芥A基因表达大量上调,请设计实验,研究A基因对该病原的响应机制(不受实验条件限制)。专家,请问这个实验怎么设计?谢谢wizardfan
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拟南芥DNA提取

谢吉勇
我用天根的试剂盒提取基因组DNA(第一次提),按照说明书一步一步操作的,但是跑胶发现什么都没有,marker存在,请问大神们,有哪些可能的原因会导致这种情况的出现?
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求助:Taiz等主编第六版《植物生理和发育》的中文版出版了么?

Korea??
Taiz等主编第六版《植物生理和发育》中文版出版了么?手上只有第五版的,但第六版对第三部分有较大改动,所以连书名也由《植物生理》改成《植物生理与发育》了。
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质粒提取问题求助

小陆hhh
用AXYGEN试剂盒小提质粒,加完S3中和液后离心有白色胶状物离不下去,提取效果不理想,请问是什么原因?
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关于crispr-cas9选择载体,请大神们解答

Lexixixi
目前我想做肿瘤细胞的基因敲除,但是在选择载体上有点纠结,px458,px459之类的载体选择哪种比较好
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新手第一次做QPCR,有些问题想问大家

unciawang
我用相同浓度的cDNA样品,为什么各个样品的β-actin以及18S内参起跳值都不一样,最大的相差十几个循环。求大神解答!!!!!用的是罗氏96仪器,trans试剂盒。qqq.png
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求带有红色荧光蛋白基因mCherry或者mStrawberry的编码序列的质粒

灰原哀控
最近在构质粒,想在载体骨架上构进一个能够编码红色荧光蛋白的基因编码序列,使载体带上荧光标签,我想通过PCR生产这个片段,但找不到合适的模板,求助各位虫友,请问谁有那种带有红色荧光蛋白基因的质粒?能否分享一下?我不会白要,可以加一下我,然后谈一下价钱,我也可以拿...
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求带有黄色荧光蛋白基因或蓝色荧光蛋白基因的编码序列的质粒

灰原哀控
最近在构质粒,想在载体骨架上构进一个能够编码黄色荧光蛋白基因或蓝色荧光蛋白基因的编码序列,使载体带上荧光标签,我想通过PCR生产这个片段,但找不到合适的模板,求助各位虫友,请问谁有这类质粒?能否分享一下?我不会白要,可以加一下我,然后谈一下价钱,我也可以拿我拥...
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PCR可能存在的错误

陈旭分子
PCR循环后电泳结果如图,要么没有条带,要么出现特异性扩增,是什么原因呢?阴性对照竟然有微弱亮度,除了被污染的情况外,还有其他哪些可能原因呢?孔1都是marker,其余三个孔为一组,分别为样品1,样品2,阴性对照。
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Hyaluronic acid

马嵬坊来润清
玻尿酸和透明质酸是同一种成分,英文名字是“Hyaluronicacid”,在台湾翻译为玻尿酸,国内翻译为透明质酸。台湾地区比国内更正接触到这个成分,加上台湾某些明星的大力宣传,让玻尿酸的叫法在国内广为流传。但是,在国内法规中,并没有玻尿酸的叫法,统一称为“透明...
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SDS-PAGE电泳,这样的结果是那些操作有问题

李敏40409
SDS-PAGE电泳,出来的图是这样的,请问都有可能是哪些操作除了问题?另外,准备做WB,可是内参的条带基本看不见,请问是什么问题?这个结果是考蓝染色一个半小时,微波炉中火洗脱,3次,一次一分半,脱色液用的是甲醇的
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请教各位老师,无缝连接的几个问题,谢谢

修晓飞
1.无缝连接中的片段和摩尔比是什么意思?怎样算?2.无缝连接哪家的试剂盒比较好?3.连接后转化DH5α中,有什么片段长度限制吗?谢谢各位大神指点迷津
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