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花生木质素酶的CDS序列,引物设计

单亦欢
各位大佬,谁能告诉一下花生木质素酶的CDS序列该怎么查找啊?我现在刚接触引物设计,之前设计了一批花生过氧化酶的引物好像设计的引物有问题。
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急!overlapPCR一直没有目的条带,恳求大家帮助

生物搬运工
各位同行好,我最近在做overlapPCR五个1500左右的片段拼接成5000左右片段。相邻片段重叠150bp。一直不成功,请问需要怎么优化可以成功嘛?谢谢啦
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请有谁买过透析袋还有Sephadex柱?

Mu子
可以分享一下?现在就是要分离68KD的蛋白质所以不晓得怎么选还想问一下那个sephadex还要自己买管子?
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荧光pcr曲线像声波一样

不要在意我
之前没遇到过这么奇怪的,今天跑荧光把我看懵,曲线像声波一样乱,求教各位老师同学,是什么原因?是药品有问题还是仪器重新问题了嘛?
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载体双酶切连接总是自连

麦芽tian
pCDH质粒中连入500bp左右的片段,酶切位点为XbaI和BamHI,质粒做双酶切时同时做了单酶切单酶切对照,,单酶切都能够切开,双酶切也能切成一条线型条带,插入片段为PCR产物,乙醇回收后做双酶切。16℃连接过夜后转化,长出的菌落PCR都是阴性,不加插入片...
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如何给芽孢杆菌加Gfp基因

小楚丶
想在芽孢杆菌加入Gfp基因,是否可以在含有Gfp的大肠杆菌中提取质粒,再转到芽孢杆菌里?抗性基因会不会在两个菌都生效呢,望大神指导一下,谢谢
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根瘤菌菌体收集及RNA提取遇到问题

一世卿安
实验室做根瘤菌方面的,收集突变体菌体时出现特别多的多糖,好不容易菌体量够了,RNA提不出来。有没有大神可否提供下思路,或者推荐好用的培养基,这种菌是慢生型根瘤菌,斜面活化一般要5-7天。跪求。
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分享《基因X》电子书

冷春杉藤
明明是很久之前的书了,可我还是找了好久,在网上找了一些资源,可是分成了好多部分,于是在某宝上买了个(别说我蠢。。。),就分享一下,有需要的可以下链接:'https://pan.baidu.com/s/1k3P8U0MMGvqE37PWk98UFQ?'提取码:0...
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原核表达载体构建的课程

ATGTAA
最近在构建载体,老板说用来表达蛋白,不太懂。由于本人本科是学化学的,没有基矗在网易云课堂上看中一门课,现在卖99,不知道有没有人买过,感觉怎么样?
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请问screw cap Teflon-sealed tube是什么管那里能买到

jjt0821
请问screwcapTeflon-sealedtube是什么那里能买到?
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请问谁有内参评价的三个软件

vovovo668
内参基因评价的三个软件的安装包:geNormNormFinderBestKeeper,请分享至'794824968qq.com',感激不尽
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请教PCR结果~

实验室小白
请教一下,最尾巴那两条是pcr产物吗?如果不是的话是啥呢?谢谢各位大神~
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请问这图如何做,谢谢!

阿布垃圾
我想知道这个图如何做的,用的是什么软件。
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rhodanese重组表达

sunxin1234
有没有大佬做过Rhodanese的表达埃我表达了几次了全都失败了埃好难受。
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PCR到qPCR的问题

moyu墨鱼
土壤DNA提取完后进行了普通PCR和凝胶成像,下一步想做qPCR,请问中间还要有哪些过渡实验吗?比如PCR产物纯化,目的基因克隆,质粒提取,测序等,是必须要做的吗?能不能用提取的DNA直接做qPCR?新手求指教?
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引物设计的问题

沈药无涯
我想请问一下各位大佬,引物设计为什么要在基因的保守区段啊,只要只要目的基因的两端的序列不就可以了么?另外想让大佬帮忙解释下这个保守区域有什么意思和什么好处
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求有经验的高手分析EMSA结果2

srlee
最近又做了几次EMSA实验,做的越多问题越多,我的EMSA梯度中间的复合物为什么是弥散的条带呢?而不像别人EMSA那样是上下两条带。求有经验的高手帮我看看这个结果,非常感谢!(见附图)EMSA2.png
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琼脂糖凝胶电泳

饶丹呀呀
pcr扩增的产物,50微升的体系,本来想切胶回收的,但是不知道为什么电泳图成了这个样子。很急,麻烦大家帮帮忙!
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一种新的引物系统 DPO引物

饿就默默地
2007年韩国一实验室开发了DPO引物系统,请问有谁在接触这一块吗?我对其做了一些改进,成本低于原系统。
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留在现公司还是去新公司?

h-hran
高中学历,巧合进入在现在的单抗公司从事养小白鼠工作,后来主管教我做纯化,前后半年时间了,挺感激她的,但工资比较低一直也没变过,养不活自己了。前几天就投了一堆简历,看看能不能找个工资高点的,没想到有个公司面试我的技术总监一口答应我的工资要求,还说会在三个月内教会...
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dsrna用6xloadingbuffer跑胶会有什么影响吗?

暴走的小鱼干
dsrna用6xloadingbuffer跑胶会有什么影响吗?
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求酵母表达载体pYES2,本人有酵母双杂交载体,可以互换。谢谢!

sunjiutong
求酵母表达载体pYES2,本人有酵母双杂交载体,可以互换。谢谢!
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哪里可以买到商业化的crispr cas9系统载体

vincint
在哺乳动物细胞和病原菌中比较高效的?
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如何确定空白质粒的类型

摩卡~~
可以通过测序确定吗,,或者有没有更好的方法
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关于PCR假阳性问题

形壬vg
1.比如说我设计的引物是扩增200bp的片段的,但是在凝胶电泳过程当中阴性对照却是在500bp处亮了而不是200bp亮,那算是假阳性吗?2.还有大佬能不能说说为啥是在500bp处亮了?我设计的引物是扩增200bp长度的埃。
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MEMEsuite分析基因家族蛋白序列motif是否完整

du20131580
如题,生信小白最近在做基因家族分析,将搜索到的蛋白序列提MEME网站,想筛出具有完整motif的蛋白序列做后续分析,但是对于反馈结果不知道怎么理解。设置参数除了motif设置10个,其它均为默认参数我想知道,是仅仅根据onlymotifsites的结果来筛选,...
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我的引物为什么一直跑不出条带

aaaccc521
(Senseprimer)5\'GAAGTGGGTTGGTGAAAGA3\'(Anti-senseprimer)5\'AGGAAGAAATGAGAATGCC3\'上下游引物的5\'端都有保护碱基和酶切位点,引物primer5评分91,blast特异性也很好,就...
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race条带很弱且多

requisite
最近在做race用的smart的takara试剂盒,很难扩出目的条带。现在有个疑问就是我的引物确信无问题(测序和转录组测序匹配过,但tm值不高大多只有50-67的样子)两轮巢式下来引物匹配的情况下总能扩出东西吧,但总是涂抹要不就是条带多且弱。实验室也有用tm值...
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免DNA提取PCR试剂盒推荐?

zouyina
在网上搜了几个免DNA提取然后PCR的试剂盒,不知道有没有虫友用过,效果怎么样?有没有推荐的品牌?
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PBS缓冲液中的氯化钠、氯化钾可不可以替换成其他钠盐、钾盐?

songrentai
大家好,本人最近在做一个卤代酶的体外表征,为了探究底物的特异性,希望尝试不同的卤素原子,但是无论是Tris-HCl还是PBS缓冲液,其中都包含大量的氯离子,会对体外实验产生干扰。因此,想请教大家,PBS缓冲液中的氯化钠、氯化钾可不可以换成其他钠盐钾盐?或者有没...
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