小木虫

pET-28a载体构建时，KAN浓度是加100μg/ml，还是50μg/ml

转基因拟南芥的筛选后培养求问转基因拟南芥用潮霉素培养基筛选后如何移出和移出后如何培养？

我有两个位点显示数据错误，但是是和其他位点一起做的，格式都是一样的，相差碱基什么的都一致，不知道哪里出现问题了，可以帮我一下吗？

请教各位大神，我向NCBI提交序列，出现了问题，首先说一下我的这个序列是经过测序验证过的，但是为什么说我序列质量低呢？请大家看看发过来的邮件，帮帮孩子吧！Wenoticedthatregionsofyoursequence(s)includenumerousa...

各位大神，请教一个问题，我现在在做质粒提取，用的是质粒提取试剂盒，浓度是14ng/ul，然后核酸电泳，照胶没有条带，这是为什么呢？

有没有好用的T载可推荐。最近的连接转化实验一直没有菌落生长，对照也没有菌落生长，不知道什么情况，求助。

想用DPBF测单线态氧，但是发现不加光敏剂的空白样，即单纯的DPBF在光激发下就会使得吸收强度的降低，那怎么判断是光敏剂产生的作用还是单纯的DPBF分解，让吸收强度降低的

选的目的基因保守结构域分别正向和反向插入多克隆位点MSC1和MSC2，中间有一段内含子序列，想使其成为发夹结构，从而干扰目的基因的表达。想请问在构建载体的时候需要正向和内含子以及反向序列形成一个完整的编码区吗？它们中间有终止密码子可以吗？还想问一下基因沉默是选...

请问谁有黑色素瘤细胞可以交换或购买吗？我有B16和A375如题，需要一些黑色素瘤细胞系：501MEL、SKmel147、SKmel2、SKmel28、SKmel239、SKmel197、SKmel94、SKmel100、SKmel173、SKmel29、SKm...

科研和临床检验场所PCR分子实验使用频率较高，PCR实验怕出问题了，当PCR出现假阳性的时候，我们常常会考虑是不是引物、试剂、Mix、模板、水等发生了污染，然后逐一排查，有时还是找不到原因，耗时耗力。那么这些试剂和仪器到底为什么会被污染了呢？其实有很大因素是核...

最近一直在做免疫细胞实验，需要这两种细胞，谁可以馈赠一些嘛？万分感谢，或者可以互换细胞

求：32位64位的primerpremier5破解软件！！！！

RPA重组聚合酶扩增速度快的原因及其原理是什么？求！

曲霉菌进行基因敲除后，形态变化验证后还是野生型，这种情况怎么解释?

曲霉菌进行基因敲除后，形态变化验证后还是野生型，这种情况怎么解释?

A549细胞状态还可与无毒性样品孵育固定30min(也尝试15min)后洗三次10min/次，拍的时候总是发现细胞膜不平整有很多小泡，而不固定的话就没有很明显，有遇到相似情况的虫友指教下谢谢~

上海精准医学研究院是上海市教委IV类高峰学科建设项目，由上海交通大学医学院牵头、依托上海交通大学医学院附属第九人民医院进行实体化建设的上海市科技协同创新中心，研究院位于浦东新区锦尊路115号的上海交通大学医学院附属第九人民医院九院科教园区，于2017年12月2...

使用pGEX-4T-1载体与我的目的基因重组，在大肠BL21中表达我的酶，破碎后去上清，测酶活，现象非常奇怪，上清与底物混合后不用反应就可以得到产物，而且灭活组是没有的，跑了SDS-PAGE在目的区太多杂蛋白无法区分，想问问大家这个上清中有没有可以某种物质可以...

各位虫友，谁有pCold-TF表达载体，能否赐一点?因为一个蛋白在pET，pGEX系列载体都不能表达，而最近一篇文章中通过pCold-TF表达该蛋白，所以想尝试用这个载体表达试一试。谢谢各位虫友，有的话能否赐一点~最后祝各位虫友实验顺利，新年快乐~

表达的蛋白质用tev酶切割后，目标蛋白无法与原蛋白分离

楼主最近用bl21(de3)表达一个含有连续脯氨酸的蛋白的时候发现，一经iptg诱导，相比于不诱导会生长的很差，蛋白电泳显示也没有我的目的蛋白，把这两个脯氨酸用pcrp掉之后又表达正常了，有虫友遇到这种情况吗？网上也没有这种情况报道呢……

大家好，我最近想构建一个基因的过表达载体。从CDS中PCR该基因（3100bp)，条带单一，大小正确，回收的基因片段测通，序列正确。但是我用同源重组的方式，将基因片段连接到慢病毒载体上，转化后酶切验证，发现插入片段只有1000bp左右，测序也发现中间有2000...

想构建2个蛋白在pet28a载体上。序列大概是：T7启动子——RBS——第一个蛋白（有终止密码子）——78bp（血清酶切割位点和T7tag）——第二个蛋白（有终止密码子）第二个蛋白前是没有RBS的请问这样第二个蛋白能正常表达吗？还是第二个蛋白表达量会少一点？还...

各位虫友，本人想用两种敲除小鼠杂交繁殖，构建双敲除小鼠，不知群里是否有这方面经验的朋友，求指教，定重谢，我的QQ1126372680