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连接转化的时候,去磷酸化吧什么都不长,不去磷酸化吧长不少全自连

天使的茶
连接转化的时候,质粒酶切后,去磷酸化吧什么都不长,不去磷酸化吧长不少全自连。做了3多个月了,都是这个结果。所有试剂材料都排除过,没有问题。请问大侠们有没有好建议啊!!!!
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求助关于TGF-β/SMAD3通路

pgju2108
请教下大家,TGF-β/SMAD3/胶原蛋白这个通路中,上游TGF-β↑/中游SMAD3不变→/下游胶原↓,这该怎么解释得通呢?在努力憋讨论
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求乳酸乳球菌NZ3900与质粒pNZ8491

啊药梁
本人的实验需要乳酸乳球菌NZ3900与质粒pNZ8491,哪位大神手上有可以赠送或者交换或者购买吗,请答复或私聊我,谢谢!!
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ThT检测淀粉样多肽聚集

怪吃草莓
请问大家用ThT检测淀粉样多肽聚集的实验中,在多肽发生聚集后,为什么ThT的荧光信号会忽升忽降(如图所示),而不是保持稳定?ThT荧光信号增长至一定值后,出现大幅度的振荡(从几百到五六千)。我的反应体系是150uL,使用的多肽浓度是5uM,ThT浓度是20uM...
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自己制备Taq酶了

lllilei1986
大家好,我是从事分子生物学的,最近准备去新公司,给我的任务是查找市面上Taq酶的种类,这个很好查找,但是要找到销量比较高的公司,这个比较难,我在百度上查找一番没有找到,有知道的大神吗?急需急需,另外我还想咨询一下,现在市面上做的Taq酶是含有832个氨基酸的那...
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招聘蛋白表达纯化、结晶实习生

booox
青云瑞晶的结构解析平台自拥有MicroED专用的透射电子显微镜、蛋白质表达纯化、结晶等一批先进实验室设备。'https://www.readcrystal.com/'公司目前有实习的职位,欢迎感兴趣的同学加入,实习完后,双方满意的话可以留在公司继续发展。实习岗...
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药物作用机制揭示应该从哪个组学入手呢?

yongxiu2008
研究一个药物对细胞信号通路的调控作用,如果对具体信号不是很清楚,这个时候从组学入手,是应该先进行转录组学开始研究吗?
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请问同一个基因的gene id 和 genebank号有什么区别?如何选用呢?

loveskyzhou
请问同一个基因的geneid和genebank号有什么区别?为什么要用两个?如何选用呢?比如genebank:NR_027341和geneID:158314
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转录因子及其下游靶基因

王丽媛西西西
想问大家一个问题,A是转录因子,B是与其互作的下游靶基因。。那么,我想问,做A的过表达或沉默株系,B的表达量一定会发生变化的,是吗?那么这种变化是如何的,A过表达,B表达量提高还是下降;A沉默,B表达量提高还是下降?我还想问,做B的过表达或沉默株系,A的表达量...
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相对定量还是绝对定量分不清楚,跪求问题,重赏!!!

sweet5210
跪求请问这段话描述的到底是相对定量pcr还是绝对定量pcr,在网上查了很多资料说相对的不需要标曲,想像他一样获得细胞中mRNA的含量完全不知道什么意思,不做这个相关的,只想要这一小部分数据,跪求回答,快毕业了好头疼。“通过测定controlRNA(在Rever...
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无半胱氨酸培养基

风思雅
最近开始铁死亡相关的研究。但是看到论文里的半胱氨酸饥饿处理,但是翻了好几篇论文也没看到相应的培养基货号,因此想问大家有知道不含半胱氨酸的细胞培养基是怎么配置的吗?还是有现成的培养基可以购买呢?
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求赠求赠野生型酵母菌株INVSc1

sunjiutong
求赠求赠野生型酵母菌株INVSc1,可交换质粒或其他菌株。
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跪求生信分析高手

我想发财
跪求,会生信的私信我
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敲除做了大半年,快郁闷死了

渣渣吼
在敲基因各种不顺利,生活也没有任何快乐而言啦
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求毕赤酵母表达中文手册

15845856241
求毕赤酵母中文手册,万分感谢!
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DNA降解的问题

望追
昨天我把三条单链放在10%FBS,37℃孵育了10h,拿出来跑结构胶(用的10xTAE,甘油上样缓冲液),跑完一看,好家伙,几乎没有降解(分了5个时间节点,条带大小和颜色几乎没有区别),有没有大佬知道什么原因的?孵育之前在-20℃保存,血清(4℃避光保存)还是...
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融合蛋白构建,要不要去掉EGFP的起始密码子

王米粒
准备构建一个融合蛋白,载体上面有个EGFP荧光标签,我想利用EGFP指示一下我的目的基因是否表达成功,因此想把EGFP与目的基因做成融合蛋白,把目的基因的终止密码子TAA删掉了,EGFP位于我的N端,要不要去掉它的起始密码子ATG?
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酵母双杂交问题,希望得到解答谢谢大家!

成功逆袭中
求:酵母双杂中BD+AD-gene共转化在4缺板上没长,但是2缺板上菌落挑在4缺+x-gal变蓝,请问是什么原因呢??
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幽门螺杆菌PCR鉴定

51778
有在做幽门螺杆菌培养和分子鉴定的,可以多多交流。可以菌株资源互换[Lasteditedby51778on2021-3-24at10:07]
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同源重组敲除芽孢杆菌中一个基因

哈哈张大倩
我是个分子生物学小白,想在短小芽孢杆菌中敲除一个基因,所以敲前的准备工作前想先问问虫友们,大家都在菌里试过啥敲除方法啊,哪种方法会相对来说好敲一些感谢感谢!
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morpholino敲降

张鑫啦啦啦
时间久了,morpholino会失效吗?之前注射MO的胚胎都有表型,时间长了以后再注射的时候发现表型不明显了
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RNA提取问题交流

外星人24
用试剂盒从总RNA中提取mRNA,提完以后测A260/280,结果也是1.8-2.0比较好吗?总RNAd的A260/280都是2.02,但提取完mRNA测结果四五次结果都是2.2左右呢?
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突变株产孢能力

啊啊一啊
求助:本人做的真菌,基因敲除后致病性下降,但是体外产孢能力和生长都变好,没怎么查到类似结果的文献,怎么解释这个现象呢
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反转录失败,求助

桃夭夭啊
跑胶验证了提取的RNA没有问题,用试剂盒反转录,一批里面总有失败的,就很绝望。也不清楚到底是哪里出了问题
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想问下有人用过么植酸么!!90%植酸是固体状

六一呀
想问下有人用过么植酸么!!90%植酸是固体状,一般生物上用来干什么,本人化学,需要用植酸,不太懂
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western blot条带

敏敏张大妈
是什么原因导致的WB条带缺失啊,应该不是孵育抗体的问题,推测是转膜过程中导致的,求助各位大神分析
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中科院深圳先进院合成所招博后

aneuploidy
中科院深圳先进院合成所招博后:PI简介:刘高雯博士,中科院深圳先进技术研究院合成生物学研究所副研究员。硕士毕业于新加坡国立大学,博士毕业于新加坡南洋理工大学,曾先后在在新加坡淡马锡生命研究所(TLL),A*STAR生物医药研究所(IMB)研究学习近6年。201...
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环介导等温扩增LAMP相关问题求解答,万分感谢!

这周你汇报
最近刚接触LAMP,用primerexplorer设计了内引物和外引物,暂时没有加环引物。参考了文献中的LAMP反应体系,用钙黄绿素进行检测。第一次按照文献中的方法模板DNA1微升、钙黄绿素浓度为25微摩尔每升,钙黄绿素加入体系后基本看不到颜色,观察不到扩增前...
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菌落扩大培养摇菌有气泡

Lotus清酒
[eimg]img/2021/0327/bw133h21873660_16[LasteditedbyLotus清酒on2021-3-27at17:11]
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