低温诱导目的蛋白较少，高温诱导目的蛋白在沉淀中
分子量为84.5kDa，载体为pET-28a，宿主为BL21，已经尝试过表达优化，低温诱导情况下提高iptg浓度以及延长诱导时间，但上清中的目的蛋白都较少，25度开始表达目的蛋白就在沉淀中，求大佬们支招下一步该怎么办
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温度再低一些，18°C@16小时，如果不行，换ArcticExpress宿主菌，降到10°C，12°C
这样的表达量不算低了
�1）可以尝试ArcticExpress温度可以低至6-8°C，
（2）或可以尝试含GroEL的辅助表达菌种参与表达
（3）如果蛋白细胞毒性大，可以考虑分泌到细胞周质或培养基中
（4）或加入MBP，GST或其他助溶标签
（5）用体外TnT表达后纯化，成本会高一些，
不知道你有没有考虑过目的蛋白不是分泌蛋白的问题，绝大部分蛋白在沉淀中可能是与细胞膜结合导致的，可以往这一方面考虑一下。