应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » rna提取步骤，大家帮我看看有没有问题
341/4返回列表1234下一页
查看: 4033  |  回复: 33
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

feng920308

铜虫 (初入文坛)

[求助] rna提取步骤，大家帮我看看有没有问题 已有8人参与

rna提出的量很多，但是都降解。。是不是提取步骤出了问题。。

rna提取步骤，大家帮我看看有没有问题


rna提取步骤，大家帮我看看有没有问题-1


发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

Molecular Biology

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-12-07 12:34:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

科学小覃

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
感觉2、3步骤静置时间有点长。还有不知道你过夜沉淀放在哪了，室温还是冰箱？总体感觉，整个实验时间太长。
赞一下(2人) 回复此楼
生物科学
2楼2015-12-07 12:57:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ttxs99

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1，最重要的改变
听我的，样品在原有的基础上****至少减半****
不然TRIZOL试剂无法保护你的样品；
2.所有耗材用无RNAase，在实验前，超净台灭菌30min，实验过程中，只要是离开超净台，超净台均开紫外，注意试剂和样品不要被灭；
3.时间，均要做一些调整
为省事把步骤和我提的效果图上传
链接: http://pan.baidu.com/s/1o6PcFgQ 密码: inxq
链接: http://pan.baidu.com/s/1getdiiJ 密码: 2q2a
4.跑胶检测。。。
胶的浓度1~1.5%，不要太软，不然条带变形
电压150v左右，时间20min以内。。
电泳液和凝胶现配现用

最后，提RNA是很多细节决定了最终结果，每个细节均要注意，其实有时候没必要用太多组织，提太多量，反正也用不完，何不保证品质呢。

第一次应助，望采纳，金币给不给无所谓
赞一下(2人) 回复此楼
淡定
14楼2015-12-07 22:19:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feng920308

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lsl635600374 at 2015-12-07 13:29:58
用研磨仪研磨时那个小球也要用DEPC水处理，浸泡过夜
2、3静置一般5-10min就可以
第8步干燥的时候可以用枪头把EP管里的乙醇吸处理，然后静置3min，再直接加无酶水溶解就好
另外，楼上说的过夜沉淀是以前分子克隆上 ...

那这些会导致rna降解嘛

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2015-12-07 13:32:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
9楼2015-12-07 20:51:06
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

zzyxiang2012

木虫 (知名作家)
加trizol室温10分钟就行了。其余的静置，离心通通10分钟。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2015-12-07 20:59:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

lsl635600374

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用研磨仪研磨时那个小球也要用DEPC水处理，浸泡过夜
2、3静置一般5-10min就可以
第8步干燥的时候可以用枪头把EP管里的乙醇吸处理，然后静置3min，再直接加无酶水溶解就好
另外，楼上说的过夜沉淀是以前分子克隆上面说的酚-异硫氰酸胍法提RNA时异丙醇-20℃过夜沉淀，现在都用trizol，一般2小时左右就行了。
赞一下 回复此楼
我们用多一点点的辛苦，来交换多一点点的幸福。
3楼2015-12-07 13:29:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feng920308

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 科学小覃 at 2015-12-07 12:57:52
感觉2、3步骤静置时间有点长。还有不知道你过夜沉淀放在哪了，室温还是冰箱？总体感觉，整个实验时间太长。

那这可能导致rna降解嘛，虽然有trizol。或者是trizol导致的降解。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2015-12-07 13:30:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lsl635600374

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by feng920308 at 2015-12-07 13:32:40
那这些会导致rna降解嘛
...

RNA在TRIzol试剂中不会被RNase污染，但在氯仿分相后的上清中已经没有了RNase的抑制剂，所以分相后的所有操作要特别小心，保证使用的离心管和枪头都是RNase-free的。这是trizol说明书上写的
赞一下 回复此楼
我们用多一点点的辛苦，来交换多一点点的幸福。
6楼2015-12-07 13:42:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

灵语晗001

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lsl635600374 at 2015-12-07 13:29:58
用研磨仪研磨时那个小球也要用DEPC水处理，浸泡过夜
2、3静置一般5-10min就可以
第8步干燥的时候可以用枪头把EP管里的乙醇吸处理，然后静置3min，再直接加无酶水溶解就好
另外，楼上说的过夜沉淀是以前分子克隆上 ...

您好，关于做实验方面的问题，可否交流下？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2015-12-07 20:37:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖仅楼主可见
赞一下
8楼2015-12-07 20:49:11
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页
相关版块跳转 我要订阅楼主 feng920308 的主题更新
341/4返回列表1234下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 什么时候开奖？ +4 CrisMessi 2026-08-18 4/200 2026-08-19 00:53 by gatelove
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 27/1350 2026-08-18 21:44 by Noways
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +3 瞬息宇宙 2026-08-15 3/150 2026-08-18 21:40 by xiaohuixin
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 9/450 2026-08-18 20:09 by 奶牛小黑
[基金申请] 朋友圈看到的 +4 wangzilk 2026-08-18 5/250 2026-08-18 19:25 by wangzilk
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +51 医学老男孩 2026-08-13 110/5500 2026-08-18 19:07 by icerianxia
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +8 基诺咪客 2026-08-17 11/550 2026-08-18 17:13 by 悠然熊猫
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +9 yuleib84 2026-08-18 10/500 2026-08-18 16:52 by archvillain
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭