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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RNA提取
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linxi8579

铜虫 (正式写手)

[求助] RNA提取 已有4人参与

各位大侠大家好，我最近在提取蚕豆根的RNA。但是提取出来的效果很差，28 18的带很弱，5S那里挺亮，怀疑可能降解了。我是用invitrogen的trizol的标准步骤操作的，叶子提取没有问题。根怎么会这样呢，有没有什么建议啊，非常感谢啦。
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1楼 2014-06-10 11:03:17
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
直接上图再说吧，关键是你要做什么

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-06-10 11:04:40
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linxi8579

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-06-10 11:04:40
直接上图再说吧，关键是你要做什么

是想做deep-seq测转录组呢
RNA提取
2014.6.2-3.jpg
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3楼2014-06-10 14:12:02
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lancao_china

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
linxi8579(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-10 20:50:49
建议换个专门提取植物RNA的试剂盒试试，价钱也不贵的，加裂解液研磨的时候可以加点Plant RNA Isolation Aid，有助于去除多糖之类的。
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4楼2014-06-10 14:28:34
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by linxi8579 at 2014-06-10 14:12:02
是想做deep-seq测转录组呢

2014.6.2-3.jpg
...

这个远没达到要求哦，可以考虑手提

[ 发自小木虫客户端 ]
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5楼2014-06-10 14:30:22
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
linxi8579(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-10 20:50:56
有些细胞RNA产量低，有些细胞内源性降解RNA厉害，容易降解的样品在trizol中加巯基乙醇，具体看说明书。
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6楼2014-06-10 18:41:12
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匿名

用户注销 (正式写手)
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7楼2014-06-12 10:07:15
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linxi8579

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lancao_china at 2014-06-10 14:28:34
建议换个专门提取植物RNA的试剂盒试试，价钱也不贵的，加裂解液研磨的时候可以加点Plant RNA Isolation Aid，有助于去除多糖之类的。

Plant RNA Isolation Aid是什么，试剂盒里的？我现在用trizol提呢，也有人建议我买天根的植物提取试剂盒提取。
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8楼2014-06-13 11:26:39
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linxi8579

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-06-10 18:41:12
有些细胞RNA产量低，有些细胞内源性降解RNA厉害，容易降解的样品在trizol中加巯基乙醇，具体看说明书。

您说加巯基乙醇，我用的是invitrogen的trizol没有提到加这个呢。并且，trizol里是含有抑制RNA酶的成分吧，我想可能是trizol以后的步骤导致降解的吧。
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9楼2014-06-13 11:27:52
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
9楼: Originally posted by linxi8579 at 2014-06-13 11:27:52
您说加巯基乙醇，我用的是invitrogen的trizol没有提到加这个呢。并且，trizol里是含有抑制RNA酶的成分吧，我想可能是trizol以后的步骤导致降解的吧。...

我以前用有柱子的试剂盒，难提的RNA加巯基乙醇，内源性降解也很重要。
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10楼2014-06-13 13:48:58
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