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金虫 (小有名气)

[求助] 金葡菌总RNA提取,请大牛们给些成熟的技术方法,谢谢谢谢! 已有1人参与

各位大牛大家好!
最近小弟正在提取金葡菌的总RNA,所在实验室没有成熟技术,但又要急需结果,请各位做过这个的大牛分享一下成熟的技术,在此谢过了!

这两天我尝试了几次,金葡菌的细菌壁不容易破,看了有些文献上介绍用的是一种溶菌酶,我暂时没买这种酶,我采用的是Trizol 提取,然后用超声破碎细菌壁,接下来就是正常的Trizol 提取的步骤,最后用1%的琼脂糖凝胶电泳跑,结果如图所示。请大家帮我分析一下原因,谢谢!

金葡菌总RNA提取,请大牛们给些成熟的技术方法,谢谢谢谢!
电泳图.jpg
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
超声波貌似能打断RNA哦

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-04-18 07:42:31
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up-to-toper

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-18 07:42:31
超声波貌似能打断RNA哦

这个问题我也想到了,确实没有见到文献上用超声破碎的。而且频率时间什么的都不好掌握。我也正考虑换其他方法。谢谢!
3楼2014-04-18 08:19:22
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by up-to-toper at 2014-04-18 08:19:22
这个问题我也想到了,确实没有见到文献上用超声破碎的。而且频率时间什么的都不好掌握。我也正考虑换其他方法。谢谢!...

不行的话,多培养点,收集菌体,液氮研磨

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-04-18 09:11:24
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up-to-toper

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-18 09:11:24
不行的话,多培养点,收集菌体,液氮研磨
...

没有见过提细菌RNA用液氮研磨的,另外,我们实验室没有液氮
5楼2014-04-18 11:58:15
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