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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 树干部位RNA的提取
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千里鼠0609

铜虫 (小有名气)

[求助] 树干部位RNA的提取

小女子第一次提RNA，材料为马尾松的一年生枝条，用TRIzol（TRIzol配合氯仿和异丙醇）法进行提取，实验步骤就是最普遍的那种··········
妹纸悲剧了·········厚着脸皮告诉大家妹纸的OD值是0.98·········捂脸·········
材料是在超净工作台外用枝剪先剪碎，然后拿进去用液氮研磨，很不好磨，弄了我一身汗······加TRIzol后还是看见有飘起来的小屑屑········
最后在加过异丙醇离心之后居然出现了一效块黄色的东东······不溶于酒精也不溶于水·······妹纸傻眼········
有没有做过这种材料的，怎样才能磨彻底捏？还有我看文献有说植物细胞中的多酚，多糖含量比较高，对实验结果有一定影响，那么TRIzol法是彻底不适合还是进行一定改动就可以运用的？
妹纸泪眼婆娑等待大侠解救中········
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1楼 2012-07-12 13:51:42
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shenye.judy

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流经验 2012-07-18 13:38:10
千里鼠0609: 金币+10, ★有帮助 2012-07-19 09:07:08
我做过根的，用CTAB法，能提出来，trizol不是万能，植物有些材料就是提不出来。当时我用4-5ml的CTAB提的，能提出来。这个方法就是配的溶液繁琐，你仔细查查，很多地方都较怎么提，怎么配的。
的确不好磨，要么多研磨会，要么找个男生帮忙！
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2楼2012-07-12 14:33:23
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千里鼠0609

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shenye.judy at 2012-07-12 14:33:23
我做过根的，用CTAB法，能提出来，trizol不是万能，植物有些材料就是提不出来。当时我用4-5ml的CTAB提的，能提出来。这个方法就是配的溶液繁琐，你仔细查查，很多地方都较怎么提，怎么配的。
的确不好磨，要么多研 ...

CTAB配的好麻烦的说，还没有试剂要现提，我打算用Trizol再试一次，提两次·······不行就得再定试剂了·········
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3楼2012-07-18 08:46:34
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wu_shiyong

银虫 (正式写手)
  妹子想研磨彻底 得加强体育锻炼啊
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低调稳重务实内敛---------------残
4楼2012-07-18 09:11:26
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千里鼠0609

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wu_shiyong at 2012-07-18 09:11:26
  妹子想研磨彻底 得加强体育锻炼啊

咩··········妹纸比较高，再壮就嫁不出去了·······
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5楼2012-07-19 09:04:45
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wu_shiyong

银虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 千里鼠0609 at 2012-07-19 09:04:45
咩··········妹纸比较高，再壮就嫁不出去了·······...

呵呵 加强锻炼是让你的肥肉变成肌肉！男人更喜欢肉感美而不是骨感美！
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低调稳重务实内敛---------------残
6楼2012-07-19 09:08:00
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jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-19 15:14:39
Invitrogen的官网上由很多关于抽提RNA的试剂，不同的材料所采用的试剂或方法是不一样的，Trizol比较适合于动物的组织和细胞，并不太适合植物组织的提取，可能是因为植物细胞壁结构或者其中含有的多糖类物质，所以，你可以尝试换一下方法，千里鼠同学，如果您真要用Trizol的话，建议少量提取，磨完后把一些纤维啥的用枪头挑出来，实验顺利
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7楼2012-07-19 11:24:10
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