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千里鼠0609

铜虫 (小有名气)

[求助] 树干部位RNA的提取

小女子第一次提RNA,材料为马尾松的一年生枝条,用TRIzol(TRIzol配合氯仿和异丙醇)法进行提取,实验步骤就是最普遍的那种··········
妹纸悲剧了·········厚着脸皮告诉大家妹纸的OD值是0.98·········捂脸·········
材料是在超净工作台外用枝剪先剪碎,然后拿进去用液氮研磨,很不好磨,弄了我一身汗······加TRIzol后还是看见有飘起来的小屑屑········
最后在加过异丙醇离心之后居然出现了一效块黄色的东东······不溶于酒精也不溶于水·······妹纸傻眼········
有没有做过这种材料的,怎样才能磨彻底捏?还有我看文献有说植物细胞中的多酚,多糖含量比较高,对实验结果有一定影响,那么TRIzol法是彻底不适合还是进行一定改动就可以运用的?
妹纸泪眼婆娑等待大侠解救中········
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shenye.judy

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流经验 2012-07-18 13:38:10
千里鼠0609: 金币+10, ★有帮助 2012-07-19 09:07:08
我做过根的,用CTAB法,能提出来,trizol不是万能,植物有些材料就是提不出来。当时我用4-5ml的CTAB提的,能提出来。这个方法就是配的溶液繁琐,你仔细查查,很多地方都较怎么提,怎么配的。
的确不好磨,要么多研磨会,要么找个男生帮忙!
2楼2012-07-12 14:33:23
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千里鼠0609

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shenye.judy at 2012-07-12 14:33:23
我做过根的,用CTAB法,能提出来,trizol不是万能,植物有些材料就是提不出来。当时我用4-5ml的CTAB提的,能提出来。这个方法就是配的溶液繁琐,你仔细查查,很多地方都较怎么提,怎么配的。
的确不好磨,要么多研 ...

CTAB配的好麻烦的说,还没有试剂要现提,我打算用Trizol再试一次,提两次·······不行就得再定试剂了·········
3楼2012-07-18 08:46:34
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wu_shiyong

银虫 (正式写手)

  妹子想研磨彻底 得加强体育锻炼啊
低调稳重务实内敛---------------残
4楼2012-07-18 09:11:26
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千里鼠0609

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wu_shiyong at 2012-07-18 09:11:26
  妹子想研磨彻底 得加强体育锻炼啊

咩··········妹纸比较高,再壮就嫁不出去了·······
5楼2012-07-19 09:04:45
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wu_shiyong

银虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 千里鼠0609 at 2012-07-19 09:04:45
咩··········妹纸比较高,再壮就嫁不出去了·······...

呵呵 加强锻炼是让你的肥肉变成肌肉!男人更喜欢肉感美而不是骨感美!
低调稳重务实内敛---------------残
6楼2012-07-19 09:08:00
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jl860822

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-19 15:14:39
Invitrogen的官网上由很多关于抽提RNA的试剂,不同的材料所采用的试剂或方法是不一样的,Trizol比较适合于动物的组织和细胞,并不太适合植物组织的提取,可能是因为植物细胞壁结构或者其中含有的多糖类物质,所以,你可以尝试换一下方法,千里鼠同学,如果您真要用Trizol的话,建议少量提取,磨完后把一些纤维啥的用枪头挑出来,实验顺利
7楼2012-07-19 11:24:10
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