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x8q4h11

木虫 (小有名气)

[交流] RNA提取已有4人参与

我用trizol试剂提取植物中的总RNA,异丙醇沉淀的时候看到明显的沉淀,类似白色,跑电泳的时候除了28s 18s两条带外,还有其他的条带,不是荧光色的(我用的goldview染色,RNA条带是绿色荧光,另外在18s后面有黄色的模糊的条带),是不是我提的RNA纯度不够(可是我测了吸光值,挺合适的)?另外,我问老师,他说RNA沉淀应该很难看到,是胶状的……各位做过RNA提取的虫友帮帮忙,给点建议,谢谢

[ Last edited by amisking on 2009-7-1 at 21:57 ]
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


sxdxrhyy(金币+1,VIP+0):欢迎常来! 4-8 09:02
黄色条带?
可能污染了少量的DNA
测OD无法区分DNA和RNA的
2楼2009-04-07 17:07:06
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x8q4h11

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-4-7 17:07:
黄色条带?
可能污染了少量的DNA
测OD无法区分DNA和RNA的

谢谢。那怎么尽量除掉DNA呢?我接下来要做反转录,有DNA污染的话是不是不可以呢?
3楼2009-04-07 20:52:00
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

提取的时候不要吸到trizol层就可以了,宁可损失一点也不要吸到下界面的东西
4楼2009-04-07 23:41:39
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x8q4h11

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-4-7 23:41:
提取的时候不要吸到trizol层就可以了,宁可损失一点也不要吸到下界面的东西

谢谢了。哦,这个我已经注意了,没有吸到任何中间相,实在不知道怎么回事了……
5楼2009-04-08 09:01:01
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112976553

金虫 (小有名气)

,帮顶,提RNA的时候,大虾们是如何减少DNA污染的呢,有何方法,告知一下下。
6楼2009-04-08 09:58:39
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jasco

木虫 (正式写手)

感觉不是dna污染,而有可能是植物样品中的多糖的污染,
7楼2009-04-08 10:47:25
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shenmene

金虫 (正式写手)

贴心小棉袄

引用回帖:
Originally posted by 112976553 at 2009-4-8 09:58:
,帮顶,提RNA的时候,大虾们是如何减少DNA污染的呢,有何方法,告知一下下。

提问
小溪边的戏水,稻田里的长长黄黄的谷穗,池塘里的小泥鳅,夏夜里的萤火虫...谁为我摘下幽兰天空的那弯月...
8楼2009-04-08 11:29:03
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

其实我只要不吸到红色的层就从未出现DNA污染……
9楼2009-04-08 11:35:48
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石头1798

新虫 (初入文坛)

你提的RNA有可能纯度不够,提RNA时,有没有戴手套,最好带上一次性手套,手上有很多RNA酶,容易使RNA降解掉。
10楼2009-04-08 11:46:50
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