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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » RNA提取
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x8q4h11

木虫 (小有名气)

[交流] RNA提取 已有4人参与

我用trizol试剂提取植物中的总RNA，异丙醇沉淀的时候看到明显的沉淀，类似白色，跑电泳的时候除了28s 18s两条带外，还有其他的条带，不是荧光色的（我用的goldview染色，RNA条带是绿色荧光，另外在18s后面有黄色的模糊的条带），是不是我提的RNA纯度不够（可是我测了吸光值，挺合适的）？另外，我问老师，他说RNA沉淀应该很难看到，是胶状的……各位做过RNA提取的虫友帮帮忙，给点建议，谢谢

[ Last edited by amisking on 2009-7-1 at 21:57 ]
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1楼 2009-04-07 14:06:29
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
sxdxrhyy(金币+1,VIP+0):欢迎常来！ 4-8 09:02
黄色条带？
可能污染了少量的DNA
测OD无法区分DNA和RNA的
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2楼2009-04-07 17:07:06
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x8q4h11

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-4-7 17:07:
黄色条带？
可能污染了少量的DNA
测OD无法区分DNA和RNA的

谢谢。那怎么尽量除掉DNA呢？我接下来要做反转录，有DNA污染的话是不是不可以呢?
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3楼2009-04-07 20:52:00
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
提取的时候不要吸到trizol层就可以了，宁可损失一点也不要吸到下界面的东西
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4楼2009-04-07 23:41:39
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x8q4h11

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-4-7 23:41:
提取的时候不要吸到trizol层就可以了，宁可损失一点也不要吸到下界面的东西

谢谢了。哦，这个我已经注意了，没有吸到任何中间相，实在不知道怎么回事了……
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5楼2009-04-08 09:01:01
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112976553

金虫 (小有名气)
,帮顶，提RNA的时候，大虾们是如何减少DNA污染的呢，有何方法，告知一下下。
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6楼2009-04-08 09:58:39
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jasco

木虫 (正式写手)
感觉不是dna污染，而有可能是植物样品中的多糖的污染，
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7楼2009-04-08 10:47:25
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shenmene

金虫 (正式写手)

贴心小棉袄
引用回帖:
Originally posted by 112976553 at 2009-4-8 09:58:
,帮顶，提RNA的时候，大虾们是如何减少DNA污染的呢，有何方法，告知一下下。

提问
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小溪边的戏水，稻田里的长长黄黄的谷穗，池塘里的小泥鳅，夏夜里的萤火虫...谁为我摘下幽兰天空的那弯月...
8楼2009-04-08 11:29:03
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
其实我只要不吸到红色的层就从未出现DNA污染……
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9楼2009-04-08 11:35:48
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石头1798

新虫 (初入文坛)
你提的RNA有可能纯度不够，提RNA时，有没有戴手套，最好带上一次性手套，手上有很多RNA酶，容易使RNA降解掉。
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10楼2009-04-08 11:46:50
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