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RNA提取
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请教各位大神,RNA提取材料一定要新鲜的吗?trizol一般1ml加多少量的样品?我做的是植物花粉,提了好几次电泳结果都不好~想请教一下,RNA提取过程有什么需要特别注意的地方?
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2014-12-26 16:48:39
可以不是新鲜,但是得是-80摄氏度保存,1ml加0.2g左右样品,仪皿高温灭菌,动作要迅速,容易RNA降解,尽量少说话,到处都存在RNA酶,所以要特别注意
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2014-12-26 16:48:47
收集到材料之后,最好能马上进行RNA制备工作。若需暂时储存,则应以液氮将生物材料急速冷冻后,储存于-80℃。在制备RNA时,将储存的材料取出,立即加入液氮研磨的方式打破细胞。1ml 的Trizol能裂解100mg左右的组织。
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3楼
2014-12-26 14:21:05
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未知时光
at 2014-12-26 14:21:05
收集到材料之后,最好能马上进行RNA制备工作。若需暂时储存,则应以液氮将生物材料急速冷冻后,储存于-80℃。在制备RNA时,将储存的材料取出,立即加入液氮研磨的方式打破细胞。1ml 的Trizol能裂解100mg左右的组织。
谢谢~我想问花粉也需要液氮冷冻以后-80储存吗?
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4楼
2014-12-28 14:31:24
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可以不是新鲜,但是得是-80摄氏度保存,1ml加0.2g左右样品,仪皿高温灭菌,动作要迅速,容易RNA降解,尽量少说话,到处都存在RNA酶,所以要特别注意
谢谢
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5楼
2014-12-28 14:31:46
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谢谢~我想问花粉也需要液氮冷冻以后-80储存吗?
...
对的,除杂质及残余花药后分装并于-80℃保存。
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6楼
2014-12-28 15:06:08
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对的,除杂质及残余花药后分装并于-80℃保存。...
谢谢
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2014-12-28 18:03:43
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对的,除杂质及残余花药后分装并于-80℃保存。...
我想问一下,新鲜的花采回来都是要在硅胶里干燥的,如果要做RNA干燥的过程是不是也会降解啊?不干燥的话要怎么把花药和杂质去掉呢?谢谢
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