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numb123

新虫 (小有名气)

[求助] RNA提取 已有2人参与

请教各位大神,RNA提取材料一定要新鲜的吗?trizol一般1ml加多少量的样品?我做的是植物花粉,提了好几次电泳结果都不好~想请教一下,RNA提取过程有什么需要特别注意的地方?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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444565008qq

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-12-26 16:48:39
可以不是新鲜,但是得是-80摄氏度保存,1ml加0.2g左右样品,仪皿高温灭菌,动作要迅速,容易RNA降解,尽量少说话,到处都存在RNA酶,所以要特别注意
2楼2014-12-26 13:33:27
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未知时光

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-12-26 16:48:47
收集到材料之后,最好能马上进行RNA制备工作。若需暂时储存,则应以液氮将生物材料急速冷冻后,储存于-80℃。在制备RNA时,将储存的材料取出,立即加入液氮研磨的方式打破细胞。1ml 的Trizol能裂解100mg左右的组织。
我想起那天夕阳下的奔跑,那是我逝去的青春。
3楼2014-12-26 14:21:05
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numb123

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 未知时光 at 2014-12-26 14:21:05
收集到材料之后,最好能马上进行RNA制备工作。若需暂时储存,则应以液氮将生物材料急速冷冻后,储存于-80℃。在制备RNA时,将储存的材料取出,立即加入液氮研磨的方式打破细胞。1ml 的Trizol能裂解100mg左右的组织。

谢谢~我想问花粉也需要液氮冷冻以后-80储存吗?

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-12-28 14:31:24
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numb123

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 444565008qq at 2014-12-26 13:33:27
可以不是新鲜,但是得是-80摄氏度保存,1ml加0.2g左右样品,仪皿高温灭菌,动作要迅速,容易RNA降解,尽量少说话,到处都存在RNA酶,所以要特别注意

谢谢

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-12-28 14:31:46
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未知时光

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by numb123 at 2014-12-28 14:31:24
谢谢~我想问花粉也需要液氮冷冻以后-80储存吗?
...

对的,除杂质及残余花药后分装并于-80℃保存。
我想起那天夕阳下的奔跑,那是我逝去的青春。
6楼2014-12-28 15:06:08
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numb123

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 未知时光 at 2014-12-28 15:06:08
对的,除杂质及残余花药后分装并于-80℃保存。...

谢谢

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2014-12-28 18:03:43
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numb123

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 未知时光 at 2014-12-28 15:06:08
对的,除杂质及残余花药后分装并于-80℃保存。...

我想问一下,新鲜的花采回来都是要在硅胶里干燥的,如果要做RNA干燥的过程是不是也会降解啊?不干燥的话要怎么把花药和杂质去掉呢?谢谢

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2014-12-28 18:17:43
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