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额敏的雪

金虫 (著名写手)

[求助] RNA提取已有4人参与

有谁用过生工的RNA提取试剂盒,本人连着提了两次,跑胶的时候什么也没有,怎么回事?
       救命啊,请问谁提取过水稻叶片RNA,用哪个厂家的,试剂盒还是直接用trizol提取的?
    本人以前用天根的trizol提玉米根系RNA,虽说有时候降解了,但是至少每次都有条带,自从工作后,实验老是失败,好苦恼啊。
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njuzhangxin

铁杆木虫 (小有名气)

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感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-03-04 19:58:58
我用自己配的试剂提的真菌RNA,5.8、18、28三条带都很清楚啊。
2楼2014-03-04 13:46:26
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njuzhangxin

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 额敏的雪 at 2014-03-05 13:34:02
现在的问题不是降解,是没有条带,就算降解也应该有 条带的是不是...

降解应该是一片糊
12楼2014-03-06 17:02:31
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普通回帖

额敏的雪

金虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by njuzhangxin at 2014-03-04 13:46:26
我用自己配的试剂提的真菌RNA,5.8、18、28三条带都很清楚啊。

我们棉花叶子用自己配的试剂,但是水稻叶子我想图个方便啊
3楼2014-03-04 13:47:57
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

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额敏的雪(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-03-04 19:58:26
我们都是用Trizol Invitrogene的,你试试这个吧,试剂盒用过天根的浓度也不高。
hehe
4楼2014-03-04 15:23:30
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太行九天

金虫 (初入文坛)


额敏的雪(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-05 14:45:53
个人觉的电泳因素也要考虑,RNA容易降解,最好时间小于十分钟,电压小于100V。
强大内心!
5楼2014-03-04 15:49:37
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额敏的雪

金虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 太行九天 at 2014-03-04 15:49:37
个人觉的电泳因素也要考虑,RNA容易降解,最好时间小于十分钟,电压小于100V。

就算全部降解也应该有5s条带吧,我的是什么都没有,就maker亮着
6楼2014-03-04 16:24:59
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njuzhangxin

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 太行九天 at 2014-03-04 15:49:37
个人觉的电泳因素也要考虑,RNA容易降解,最好时间小于十分钟,电压小于100V。

电泳槽、电泳液、胶等都需用RNA out处理,电泳我是用150 v,跑15 min
7楼2014-03-05 12:59:47
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额敏的雪

金虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by njuzhangxin at 2014-03-05 12:59:47
电泳槽、电泳液、胶等都需用RNA out处理,电泳我是用150 v,跑15 min...

现在的问题不是降解,是没有条带,就算降解也应该有 条带的是不是
8楼2014-03-05 13:34:02
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太行九天

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 额敏的雪 at 2014-03-05 13:34:02
现在的问题不是降解,是没有条带,就算降解也应该有 条带的是不是...

没提过RNA,我提质粒用天根的试剂盒,效果还不错,可以参考一下。
强大内心!
9楼2014-03-06 09:36:50
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liling0601

铜虫 (小有名气)

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我最近在用CTAB和trizol提花瓣RNA,测出来浓度还好,260/280也很好,就是一跑胶就降解(120,25Min),能看到两条条带,大神们,帮我分析下啊,谢谢。
10楼2014-03-06 11:37:31
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