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树叶andy

新虫 (初入文坛)

[求助] RNA提取

各位大虾们:
小弟最近提取RNA总是出现褐色沉淀,RNA提取的效果也不好,提取的是AM的RNA,不知道大虾们有什么建议?谢谢了!
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niushuaiji

金虫 (正式写手)

不放弃的小鸟

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裂解液中加入巯基乙醇或者是终浓度为1-2%的巯基乙醇,出现褐色不是多糖的影响(确定是否是多糖含量高可以测下紫外吸收),而是酚类氧化了。另外,试剂盒提取会带有比常规方法多的DNA,需要考虑到对后续实验的影响!本人觉着含有多糖或酚类较多的材料的DNA提取,SDS裂解并NaAc65度沉淀是比CTAB法好的多!
Tobeornottobe,that'saproblem
8楼2012-03-06 10:07:13
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普通回帖

xiangbchen

金虫 (正式写手)

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建议使用CTAB法提取总RNA,去多糖等杂质的能力好一点
2楼2012-03-05 14:18:52
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

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用试剂盒呢?可以试试,一般比较干净
3楼2012-03-05 17:38:27
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zoulong312

木虫 (小有名气)

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建议使用试剂盒提取,方便又省时间,效果一般不错。
Dragon
4楼2012-03-05 20:41:05
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shizishanshang

至尊木虫 (职业作家)

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可以试试CTAB或者SDS法,有些材料试剂盒是提不好的
5楼2012-03-05 21:46:58
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怎么都行

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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在提DNA的时候为防止褐化可以加PVP-40,不知道提RNA时可不可以。
6楼2012-03-05 23:30:32
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匿名

用户注销 (正式写手)

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本帖仅楼主可见
7楼2012-03-06 09:09:40
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deyari

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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你真想找到原因的话就应该把你用的什么方法,什么试剂都写清楚了,你只来这么一句我们怎么猜呢?
9楼2012-03-06 10:40:41
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Rusfell

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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恩 , 用omega试剂盒提吧,很容易操作的
10楼2012-03-06 23:22:56
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