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树叶andy

新虫 (初入文坛)

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虫号: 1514159
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专业: 环境微生物学

[求助] RNA提取

各位大虾们：
小弟最近提取RNA总是出现褐色沉淀，RNA提取的效果也不好，提取的是AM的RNA，不知道大虾们有什么建议？谢谢了！

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1楼 2012-03-05 13:56:59

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

niushuaiji

金虫 (正式写手)

不放弃的小鸟

BioEPI: 1
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在线: 132.5小时
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注册: 2011-03-01
性别: GG
专业: 临床生物化学检验

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

裂解液中加入巯基乙醇或者是终浓度为1-2%的巯基乙醇，出现褐色不是多糖的影响（确定是否是多糖含量高可以测下紫外吸收），而是酚类氧化了。另外，试剂盒提取会带有比常规方法多的DNA，需要考虑到对后续实验的影响！本人觉着含有多糖或酚类较多的材料的DNA提取，SDS裂解并NaAc65度沉淀是比CTAB法好的多！