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feng920308

铜虫 (初入文坛)

[求助] rna提取步骤,大家帮我看看有没有问题 已有8人参与

rna提出的量很多,但是都降解。。是不是提取步骤出了问题。。

rna提取步骤,大家帮我看看有没有问题


rna提取步骤,大家帮我看看有没有问题-1


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lsl635600374

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用研磨仪研磨时那个小球也要用DEPC水处理,浸泡过夜
2、3静置一般5-10min就可以
第8步干燥的时候可以用枪头把EP管里的乙醇吸处理,然后静置3min,再直接加无酶水溶解就好
另外,楼上说的过夜沉淀是以前分子克隆上面说的酚-异硫氰酸胍法提RNA时异丙醇-20℃过夜沉淀,现在都用trizol,一般2小时左右就行了。
我们用多一点点的辛苦,来交换多一点点的幸福。
3楼2015-12-07 13:29:58
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科学小覃

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感觉2、3步骤静置时间有点长。还有不知道你过夜沉淀放在哪了,室温还是冰箱?总体感觉,整个实验时间太长。
生物科学
2楼2015-12-07 12:57:52
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feng920308

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 科学小覃 at 2015-12-07 12:57:52
感觉2、3步骤静置时间有点长。还有不知道你过夜沉淀放在哪了,室温还是冰箱?总体感觉,整个实验时间太长。

那这可能导致rna降解嘛,虽然有trizol。或者是trizol导致的降解。

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4楼2015-12-07 13:30:57
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feng920308

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lsl635600374 at 2015-12-07 13:29:58
用研磨仪研磨时那个小球也要用DEPC水处理,浸泡过夜
2、3静置一般5-10min就可以
第8步干燥的时候可以用枪头把EP管里的乙醇吸处理,然后静置3min,再直接加无酶水溶解就好
另外,楼上说的过夜沉淀是以前分子克隆上 ...

那这些会导致rna降解嘛

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5楼2015-12-07 13:32:40
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