24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 4337  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

胡彦小科

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR跑不出来的原因 已有6人参与

我的pcr产物用来做酶切的,但是现在做了很多条件的优化,现在就是做不出来!有时能跑出来有时跑不出来。
自己分析原因如下:
1.引物的原因:对引物进行条件摸索时,条带很明显,后我把引物冻存在4摄氏度的冰箱。
2.DNA模板问题,我们用DNA直接跑电泳也有条带出现,并对稀释产物做了梯度PCR,但还是未跑出PCR
3.rTaq酶原因:采用了赛默飞、宝生物、天根用了不同的反应体系
4.PCR仪:用了三种不同的PCR仪都未出结果
已经进行了一个月了还是未出结果,希望大神们能帮忙分析一下原因。好早日做完实验。

PCR跑不出来的原因
引物退火温度梯度PCR.png


PCR跑不出来的原因-1
pcr跑出来的.png


PCR跑不出来的原因-2
DNA.png
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

胡彦小科

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 枭翔 at 2015-09-07 10:54:51
你应该介绍一下你的电泳图,要不然大家没法帮你解答问题

第一个电泳图跑的是4对引物的退火温度梯度,每对引物有6个梯度的温度。第二张图用这四对引物进行PCR就跑出来过的,后来再跑就没出来过了。然后我们怀疑DNA有问题就对DNA跑胶,看DNA的胶图觉得DNA没得问题,对DNA稀释后也没跑出来。现在想做PCR-RFLP,跑不出PCR没法做酶切
6楼2015-09-08 16:12:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

枭翔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你应该介绍一下你的电泳图,要不然大家没法帮你解答问题
2楼2015-09-07 10:54:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xrxleisure

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
图片表述的不是很清楚。
3楼2015-09-07 13:47:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hbincs

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我原来有过这样的情况,连着一个星期没有一点结果,后来暂停一段时间继续的话就好了。然后看你的图看不出什么问题,你那个PCR程序呢?
4楼2015-09-07 15:31:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 319求调剂 +13 太容易1018 2026-04-01 13/650 2026-04-02 11:39 by Sammy2
[考研] 296材料专硕求调剂 +8 202451007219 2026-04-02 9/450 2026-04-02 11:34 by Sammy2
[考研] 085601 材料工程 313分 求调剂 +7 Ong3 2026-03-27 7/350 2026-04-02 11:29 by 3041
[考研] 材料专硕322分 +4 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-02 4/200 2026-04-02 10:26 by Wang200018
[考研] 348环境工程调剂 +3 吴彦祖24k 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:14 by nanaliuyun
[考研] 调剂推荐 +10 清酒714 2026-03-26 12/600 2026-04-02 07:57 by 尚水阁主
[考研] 求调剂0703 +5 周嘉尧 2026-03-31 8/400 2026-04-01 20:32 by ltltkkk
[考研] 353求调剂 +4 拉钩不许变 2026-04-01 4/200 2026-04-01 18:10 by 记事本2026
[考研] 材料专业调剂 +5 啦啦啦哭 2026-03-31 6/300 2026-04-01 16:48 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +4 DADA怪 2026-03-31 4/200 2026-04-01 14:30 by ZXlzxl0425
[硕博家园] 博一被送出联培感觉不适应怎么办 +3 全村的狗 2026-03-31 3/150 2026-04-01 10:44 by 328838485
[考研] 086000调剂 +5 7901117076 2026-03-26 5/250 2026-03-31 17:45 by 544594351
[考研] 本科211安全工程,初试290分,求调剂 +3 2719846834 2026-03-28 3/150 2026-03-31 13:52 by 热情沙漠
[考研] 297 地理学070500 复试求调剂 +3 小圆圈圈ooo 2026-03-30 3/150 2026-03-30 21:05 by 余震yz
[考研] 086000生物与医药调剂 +5 Feisty。 2026-03-28 9/450 2026-03-29 12:02 by longlotian
[考研] 求调剂 +7 争取九点睡 2026-03-28 8/400 2026-03-28 21:07 by 争取九点睡
[考研] 本科新能源科学与工程,一志愿华理能动285求调剂 +7 AZMK 2026-03-28 11/550 2026-03-28 21:01 by xxxsssccc
[考研] 复试调剂 +3 raojunqi0129 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:27 by 落睿可思
[考研] 305求调剂 +5 哇卢卡库 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:01 by laoshidan
[考研] 一志愿吉大071010,316分求调剂 +3 xgbiknn 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:36 by guoweigw
信息提示
请填处理意见