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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 我是新人，麻烦大家帮忙~我的pcr扩增电泳图没跑出来！
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Hye徐

铜虫 (初入文坛)

[求助] 我是新人，麻烦大家帮忙~我的pcr扩增电泳图没跑出来！ 已有4人参与

今天我们做实验的，我的pcr扩增电泳图没跑出来！
感觉是我在用微量加样枪加双蒸水的时候加少了，不知道双蒸水加少了会不会导致电泳图跑不出来？还是其他什么原因呢？
感觉我是不怎么会用加样枪。。。。哎，希望高手帮我解答下，没有多少悬赏，不好意思是新人~
图片最左边是marker ，第三个没跑出来的是我的。。。%>_<%

我是新人，麻烦大家帮忙~我的pcr扩增电泳图没跑出来！
2014-10-13 第二组.JPG
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1楼 2014-10-13 22:41:23
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

反应链

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Hye徐 at 2014-10-13 23:29:55
是呀，知道不是电泳的问题，我加双蒸水时好像加少了，不知道双蒸水在pcr实验中的作用是什么？是导致失败的原因吗？
...

影响pH, 离子浓度，抑制酶活性，从而不成。体系小了，还容易蒸发。实验室多操作几次就好。大一？
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4楼2014-10-13 23:58:55
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
Hye徐: 金币+1, ★有帮助 2014-10-14 23:03:49
我看着有三条带，但是很浅。
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9楼2014-10-14 11:29:55
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Insecta_A

铜虫 (小有名气)
感觉啥都没有，应该是少加了某种东西了，是不是酶加漏了
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12楼2014-10-15 09:30:26
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852634230

新虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-15 15:03:05
水加少了不会有问题的，我通常水加的的或多或少，没有影响。如果酶和底物没有问题的话，那就是引物的问题了，有的引物可以存放几个月，有的引物放一周左右再用就跑不出带了，经验之谈。
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今日你对我爱答不理，明天让你高攀不起
13楼2014-10-15 10:22:44
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普通回帖

反应链

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Hye徐: 金币+2, ★有帮助 2014-10-14 11:10:51
PCR失败，没有产物，不关电泳的事。教学实验课？
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2楼2014-10-13 23:25:28
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Hye徐

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 反应链 at 2014-10-13 23:25:28
PCR失败，没有产物，不关电泳的事。教学实验课？

是呀，知道不是电泳的问题，我加双蒸水时好像加少了，不知道双蒸水在pcr实验中的作用是什么？是导致失败的原因吗？

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3楼2014-10-13 23:29:55
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Hye徐

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 反应链 at 2014-10-13 23:58:55
影响pH, 离子浓度，抑制酶活性，从而不成。体系小了，还容易蒸发。实验室多操作几次就好。大一？...

谢谢你。我大三了

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5楼2014-10-14 07:43:32
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Hye徐

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 反应链 at 2014-10-13 23:58:55
影响pH, 离子浓度，抑制酶活性，从而不成。体系小了，还容易蒸发。实验室多操作几次就好。大一？...

那如果是其他成分加的量有问题，是不是也会失败？做实验的时候才发现我们不会用加样枪，可是我是第一个加的，本来想重做的，可是没有::>_<::

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6楼2014-10-14 07:46:41
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yunshenglmm

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
Hye徐: 金币+1, ★有帮助 2014-10-14 11:09:38
引物二聚体也没有，应该是PCR体系的问题，和电泳没有关系
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7楼2014-10-14 11:03:58
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Hye徐

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by yunshenglmm at 2014-10-14 11:03:58
引物二聚体也没有，应该是PCR体系的问题，和电泳没有关系

恩恩，是的！
这个对成分的量要求是不是很严格呀？我加样枪不怎么会用所以导致PCR不成功的吗？
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8楼2014-10-14 11:08:46
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Hye徐

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-10-14 11:29:55
我看着有三条带，但是很浅。

是吗？你好厉害！这都看得见，为啥这么浅呢？

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10楼2014-10-14 23:03:27
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