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Hye徐

铜虫 (初入文坛)

[求助] 我是新人,麻烦大家帮忙~我的pcr扩增电泳图没跑出来! 已有4人参与

今天我们做实验的,我的pcr扩增电泳图没跑出来!
感觉是我在用微量加样枪加双蒸水的时候加少了,不知道双蒸水加少了会不会导致电泳图跑不出来?还是其他什么原因呢?
感觉我是不怎么会用加样枪。。。。哎,希望高手帮我解答下,没有多少悬赏,不好意思是新人~
图片最左边是marker ,第三个没跑出来的是我的。。。%>_<%

我是新人,麻烦大家帮忙~我的pcr扩增电泳图没跑出来!
2014-10-13 第二组.JPG
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反应链

新虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Hye徐 at 2014-10-13 23:29:55
是呀,知道不是电泳的问题,我加双蒸水时好像加少了,不知道双蒸水在pcr实验中的作用是什么?是导致失败的原因吗?
...

影响pH, 离子浓度,抑制酶活性,从而不成。体系小了,还容易蒸发。实验室多操作几次就好。大一?
4楼2014-10-13 23:58:55
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
Hye徐: 金币+1, 有帮助 2014-10-14 23:03:49
我看着有三条带,但是很浅。
9楼2014-10-14 11:29:55
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Insecta_A

铜虫 (小有名气)

感觉啥都没有,应该是少加了某种东西了,是不是酶加漏了
12楼2014-10-15 09:30:26
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852634230

新虫 (初入文坛)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-15 15:03:05
水加少了不会有问题的,我通常水加的的或多或少,没有影响。如果酶和底物没有问题的话,那就是引物的问题了,有的引物可以存放几个月,有的引物放一周左右再用就跑不出带了,经验之谈。
今日你对我爱答不理,明天让你高攀不起
13楼2014-10-15 10:22:44
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普通回帖

反应链

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Hye徐: 金币+2, 有帮助 2014-10-14 11:10:51
PCR失败,没有产物,不关电泳的事。教学实验课?
2楼2014-10-13 23:25:28
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Hye徐

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 反应链 at 2014-10-13 23:25:28
PCR失败,没有产物,不关电泳的事。教学实验课?

是呀,知道不是电泳的问题,我加双蒸水时好像加少了,不知道双蒸水在pcr实验中的作用是什么?是导致失败的原因吗?

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-10-13 23:29:55
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Hye徐

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 反应链 at 2014-10-13 23:58:55
影响pH, 离子浓度,抑制酶活性,从而不成。体系小了,还容易蒸发。实验室多操作几次就好。大一?...

谢谢你。我大三了

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-10-14 07:43:32
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Hye徐

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 反应链 at 2014-10-13 23:58:55
影响pH, 离子浓度,抑制酶活性,从而不成。体系小了,还容易蒸发。实验室多操作几次就好。大一?...

那如果是其他成分加的量有问题,是不是也会失败?做实验的时候才发现我们不会用加样枪,可是我是第一个加的,本来想重做的,可是没有::>_<::

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2014-10-14 07:46:41
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yunshenglmm

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
Hye徐: 金币+1, 有帮助 2014-10-14 11:09:38
引物二聚体也没有,应该是PCR体系的问题,和电泳没有关系
7楼2014-10-14 11:03:58
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Hye徐

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by yunshenglmm at 2014-10-14 11:03:58
引物二聚体也没有,应该是PCR体系的问题,和电泳没有关系

恩恩,是的!
这个对成分的量要求是不是很严格呀?我加样枪不怎么会用所以导致PCR不成功的吗?
8楼2014-10-14 11:08:46
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Hye徐

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-10-14 11:29:55
我看着有三条带,但是很浅。

是吗?你好厉害!这都看得见,为啥这么浅呢?

[ 发自小木虫客户端 ]
10楼2014-10-14 23:03:27
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