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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] 琼脂糖凝胶电泳突然完全跑不出DNA条带了!求助!!!

本人这几天在做水稻种子质量检测的,引物什么的都是筛选好的,DNA新提的,应该也没问题;但同样的步骤,师兄配的DNA体系就能P出来并跑成功,而我一直都P不出来,不知什么原因?
现在原因基本上是出在配置PCR体系上,体系(20uL):引物 +0.3/-0.3,4*dNTP 0.3,10*buffer(Mg2+) 2,ddH2O 15.9,Taq 0.2,DNA 1.同样的DNA,同样的用量,师兄就能基本全P出来,我跑电泳就是模糊一条,或干脆啥都没有。我想破脑袋了也想不出是什么原因,请赐教。
我们是一次就配将近100管,然后分装进96个,师兄ddH2O实际上是16uL/管,但他配100管的量基本能用完。
胶是琼脂胶,4%(1*TAE)
好吧,能跑出来才是王道。
过段时间会把悲催的对比图加上。
而且,最要命的是,我之前能P出条带的DNA也再也P不出来了。
这是师兄配好体系后我跑PCR跑胶的效果:
琼脂糖凝胶电泳突然完全跑不出DNA条带了!求助!!!
捕获1.JPG

这是师兄配好缓冲溶液后我加DNA分配缓冲液后再跑的效果:
琼脂糖凝胶电泳突然完全跑不出DNA条带了!求助!!!-1
捕获2.JPG
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