| 查看: 1643 | 回复: 0 | ||
[求助]
琼脂糖凝胶电泳突然完全跑不出DNA条带了！求助！！！
|
|
本人这几天在做水稻种子质量检测的，引物什么的都是筛选好的，DNA新提的，应该也没问题；但同样的步骤，师兄配的DNA体系就能P出来并跑成功，而我一直都P不出来，不知什么原因？ 现在原因基本上是出在配置PCR体系上，体系（20uL）：引物 +0.3/-0.3，4*dNTP 0.3，10*buffer(Mg2+) 2，ddH2O 15.9，Taq 0.2，DNA 1.同样的DNA，同样的用量，师兄就能基本全P出来，我跑电泳就是模糊一条，或干脆啥都没有。我想破脑袋了也想不出是什么原因，请赐教。 我们是一次就配将近100管，然后分装进96个，师兄ddH2O实际上是16uL/管，但他配100管的量基本能用完。 胶是琼脂胶，4%（1*TAE） 好吧，能跑出来才是王道。 过段时间会把悲催的对比图加上。 而且，最要命的是，我之前能P出条带的DNA也再也P不出来了。 这是师兄配好体系后我跑PCR跑胶的效果：  捕获1.JPG 这是师兄配好缓冲溶液后我加DNA分配缓冲液后再跑的效果：  捕获2.JPG |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有70人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复