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载体构建菌液序列比对最后碱基不一样能用么?
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ch510246602
新虫
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虫号: 3584420
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专业: 植物生理与生化
[交流]
载体构建菌液序列比对最后碱基不一样能用么?
已有3人参与
构建原核载体,用的28a,序列对比发现前边都还好,后边有10多个碱基不对,不知道能否用呢?哪位大神给我指点迷津啊。
bzip29为目的片段。28a-bzip29为菌液测序结果。
捕获.PNG
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1楼
2015-07-01 18:05:04
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zhaozhibozhi
金虫
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专业: 植物病理学
★
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测序最开始的10-20个碱基是不准确的
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做一个阳光、开朗的小和尚
2楼
2015-07-02 08:34:02
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sundan611
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虫号: 2818417
注册: 2013-11-21
专业: 生物化学
★
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1.目的片段多长啊?一般测序反应头30-50个碱基不准确也是正常的,一个测序反应理论能测800-900bp,所以看你目的片段多长了,有的时候需要正反向相测序拼接,有的时候需要分段测序,建议你正反向拼接测看看,方便的话能否把你中文版的DNAMAN软件给我传一份,谢谢!
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3楼
2015-07-02 16:01:32
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新虫
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虫号: 2180357
注册: 2012-12-11
性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不用测了,正如楼上说的,估计那里正好是测不准的,你可以看看测序的图谱,峰很乱就是测不准。不过最后怎么会突变呢,那可是正反向引物所在序列啊。
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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初来乍到,请多指教
4楼
2015-07-05 08:47:41
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