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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 会反转录PCR的进来看一下可以么
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sunflower_J

新虫 (小有名气)

[交流] 会反转录PCR的进来看一下可以么 已有3人参与

我想做反转录PCR，结果跑胶对比灰度值，我想问问引物怎么设计，一定要包含全部编码基因吗？

有的序列7000多，没办法包括全部编码基因怎么办。虽然设计个基因是不是也不能有参考性
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1楼 2015-05-08 12:11:26
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晞朔

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-09 22:38:25
“结果跑胶对比灰度值”是什么意思？是想半定量PCR检测基因表达吗？若是半定量，选取一段特异序列设计引物就可以，不可有非特异扩增和二聚体。我一般设计片段长度300-600bp
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2楼2015-05-09 07:53:12
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sunflower_J

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-05-09 07:53:12
“结果跑胶对比灰度值”是什么意思？是想半定量PCR检测基因表达吗？若是半定量，选取一段特异序列设计引物就可以，不可有非特异扩增和二聚体。我一般设计片段长度300-600bp

对 就是半定量
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3楼2015-05-11 12:44:41
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)
★
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不需要，好像200bp-400bp都夠了，最好誇內含子

[ 发自小木虫客户端 ]
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天道酬勤
4楼2015-05-11 23:00:33
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yingheqian

金虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一楼，四楼都是对的，跨内含子确实好一些

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2015-05-12 05:08:04
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