应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 做miRNA定量PCR之前的反转录
101/1返回列表
查看: 2722  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

你是我的幸福

新虫 (正式写手)

[求助] 做miRNA定量PCR之前的反转录 已有2人参与

最近准备做定量PCR检测不同组织miRNA的表达量差异，RNA已提取好，反转录不知道该怎么做了，听说miRNA要设计特别的反转录引物，叫什么颈环引物，具体是怎么回事，请知道的大侠不吝赐教啊！最好是有miRNA反转录的详细操作步骤，以及引物设计的方法
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生化实验经验积累 miRNA测序数据分析

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-04-25 21:55:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

froess

新虫 (初入文坛)
★ ★
你是我的幸福(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-05-01 21:00:15
gyesang: 回帖置顶 2013-05-01 21:02:25
茎环引物是特异针对miRNA设计的引物，由于miRNA长度很短，往往引物长度都大于它本身，不利于引物结合。茎环引物是环状的，其中有6~8nt与miRNA互补，这样可以连接并增长，如果你还不明白，可以搜相关文献看看，然后建议找公司直接合成，很多公司都有miRNA反转录试剂盒并能提供引物设计服务呢，我就是直接找公司做的
赞一下 回复此楼
3楼2013-05-01 20:57:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

meigaofu

禁虫 (小有名气)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1<br>你是我的幸福: 金币+1, <font color=red>★</font>有帮助 <font color="gray">2013-04-30 08:19:20</font>
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-01 20:59:57
本帖内容被屏蔽
2楼2013-04-28 19:27:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

henka

新虫 (初入文坛)
mRNA应该尝试takara的，的确不错，不过他们是我们竞争对手，所以我不会把资料给你的。
赞一下 回复此楼
4楼2013-05-01 22:17:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

领航123456

新虫 (初入文坛)
楼主要做的是miRNA的定量检测，怎么不提取miRNA呢，另外反转录试剂盒我给你推荐海基的，因为我在用的就是这个盒子（说多了，就被打为广告），你可以去他们网站下说明书看看，我用了两个了，定量也不错。
赞一下 回复此楼
5楼2015-05-07 09:19:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

齐洛儿

新虫 (初入文坛)
6楼2015-11-18 21:37:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

齐洛儿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 齐洛儿 at 2015-11-18 21:37:12

本来想要回复的，结果全是表情，楼主能留个联系方式么（Q什么的），请教些问题，

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2015-11-19 08:57:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

uulovelyuu

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

如果想特异性高一点，就自己设计茎环法定引物，可能需要优化；也可以买试剂盒，一般采用3‘加polyA 尾巴的方法，一次可以反转录好多目的片段。看你具体的实验设计和实验室条件了，百度上都能搜索到具体的方法。
赞一下 回复此楼
8楼2015-11-19 13:06:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qspyyy

木虫 (职业作家)
我只看看我不说话

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
喜欢实验。。。不喜欢写文章。。。
9楼2015-11-19 13:12:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

铿锵爪神

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

颈环引物我们都是买的锐博的，还凑合吧

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2015-11-19 19:23:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 你是我的幸福 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 河北省自然科学基金 +5 Peterchao 2026-05-18 6/300 2026-05-23 13:28 by Peterchao
[基金申请] 青B发送上会通知了吗 +5 chemBioBro 2026-05-22 7/350 2026-05-23 12:35 by zhuifengzhy
[考博] 博士申请 +3 焦晓明 2026-05-21 3/150 2026-05-23 11:26 by mlc840311
[考博] 26/27申博自荐 10+3 ZXW0202 2026-05-22 5/250 2026-05-23 09:40 by shen1253
[教师之家] 某211大学教师把个人教师官方主页改成:我跑了我跑了我跑了!官宣跑路！ +3 zju2000 2026-05-21 4/200 2026-05-23 08:33 by xli1984
[基金申请] 今年审到国自然15份，谈谈感受 +27 国自然国社科中 2026-05-17 28/1400 2026-05-22 16:25 by hunter无悔
[论文投稿] 投稿求助，期刊 +4 希冀，有书读 2026-05-20 8/400 2026-05-22 10:16 by 希冀，有书读
[文学芳草园] 献血感触 +7 呀呀好傻 2026-05-19 13/650 2026-05-21 20:15 by 呀呀好傻
[基金申请] 面上本子正文33页，违规吗？会被低分嘛？ +14 1234567wang 2026-05-17 16/800 2026-05-21 17:58 by 脆脆的饼干
[基金申请] 国自然评分 +4 无名者登山 2026-05-20 5/250 2026-05-21 16:35 by swuq
[基金申请] 国自然上会要求 +7 无名者登山 2026-05-18 11/550 2026-05-21 15:50 by draco1987
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +9 fummck 2026-05-20 10/500 2026-05-21 14:17 by draco1987
[基金申请] 评审有感 +15 popular289 2026-05-18 26/1300 2026-05-21 10:35 by 西葫芦炒鸡蛋
[论文投稿] Sci. Bull. 悲剧经验 +7 jyang1999 2026-05-16 8/400 2026-05-21 08:50 by 能丫
[论文投稿] 投MDPI的三个期刊都被桌拒 +3 木虫研究牲 2026-05-17 4/200 2026-05-21 08:02 by bobvan
[考博] 云南大学材料与能源学院解琳课题组钙钛矿博士招生 +4 光伏爱好者 2026-05-17 6/300 2026-05-21 01:37 by 17520222914
[有机交流] 反应很差，大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[考博] 如果工作了想读博，可以边工作边读全日制嘛？ 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
[硕博家园] 我在等一个没有答案的答案 +3 Love_MH 2026-05-17 3/150 2026-05-18 02:22 by 竹林孤影
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭