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tongxinkxy

银虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】羊反转录产物做PCR,3KB,是EX TAQ好,还是LA TAQ 好

羊反转录产物做PCR,3KB,是EX TAQ好,还是LA TAQ 好
后面要做原核表达,所以最好不要有突变
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tongxinkxy(金币+3): 2011-03-23 09:55:54
la保真性要好点。
不过这两个酶保真性都不是最好的。
2楼2011-03-23 09:50:12
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tongxinkxy

银虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-03-23 09:50:12:
la保真性要好点。
不过这两个酶保真性都不是最好的。

请问保真性好的什么酶呢?
3楼2011-03-23 09:53:42
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tongxinkxy

银虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-03-23 09:50:12:
la保真性要好点。
不过这两个酶保真性都不是最好的。

LA的对与3kb片段,会出现突变的几率高吗?
4楼2011-03-23 09:58:51
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tongxinkxy(金币+1): 2011-03-23 16:08:34
引用回帖:
Originally posted by tongxinkxy at 2011-03-23 09:53:42:
请问保真性好的什么酶呢?

比如probest保真性就比La-taq好。
5楼2011-03-23 09:59:38
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tongxinkxy(金币+3): 2011-03-23 16:08:25
引用回帖:
Originally posted by tongxinkxy at 2011-03-23 09:58:51:
LA的对与3kb片段,会出现突变的几率高吗?

La是个混合的酶,好像是Ex和pfu按照一定的比例混合的,目的是为了活性较好,并且保真性比Ex强。3K不好说,看运气了。
不过建议还是先用probest扩增看看吧,做表达我们首先肯定是用高保真性酶扩增的,实在扩不出来才会选其他的酶。
6楼2011-03-23 10:03:50
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yabxxh

木虫 (正式写手)


tongxinkxy(金币+3): 2011-03-23 16:08:19
这个建议还是用Primer Star试一下,我的3K的高GC片段扩增出来没一点事,好运
7楼2011-03-23 11:13:20
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