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lilylil

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 39.7
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在线: 57.5小时
虫号: 3013961
注册: 2014-03-03
性别: MM
专业: 兽医免疫学

[求助] 双酶切问题，急~ 已有18人参与

本人现在用Not I 和EcoR I 双酶切，目的片段60bp,载体是PUC57总是显示一条带，用酶各自单切都可切开，用的是Takara的酶。
反应体系1μl Not I
            1μl EcoR I
            4μl 0.1% BSA
            4μl 10×H
            25μl 质粒（≤1μg）
            5μl 水
37℃，3h
现在实验就卡在这了，很急请大家多多指导

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1楼 2015-05-04 16:27:42

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chyanqiu

金虫 (小有名气)

应助: 4 (幼儿园)
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【答案】应助回帖

★
lilylil(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-11 17:03:54

用高浓度胶跑电泳，不管有没有看到条带，都将对应位置的胶切下来做回收。如果切的量足够，用回收小片的方法回收，应该没问题的。如果实在不放心，可以先测序。有了测序结果再做

12楼2015-05-08 10:09:10

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

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