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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 求助设计一种克隆方法
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397608492

新虫 (小有名气)

[求助] 求助设计一种克隆方法 已有1人参与

如题
        刚刚接手一个新课题，要克隆来源于一种植物的一段基因到宿主里面，但是这个植物没有被测过序，基因序列也不知道，只知道该基因编码蛋白N端的10个氨基酸序列和蛋白质的分子量大小(前人的工作)，新手第一次发帖，金币不多，大恩不言谢。
P.S：我个人认为应该要通过mRNA弄RT-PCR，但是这个引物不好设计啊，该怎么办呢？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2015-04-20 00:34:46
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sandycool

铁虫 (正式写手)
你好，请问现在你做到哪一步了？

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7楼2015-10-24 10:02:37
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)
我想知道既然不知道基因序列，是如何知道的N端的10个序列的，使蛋白测序，质谱，还是比较的同源物种。
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2楼2015-04-20 07:54:06
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397608492

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hanxiaominhu at 2015-04-20 07:54:06
我想知道既然不知道基因序列，是如何知道的N端的10个序列的，使蛋白测序，质谱，还是比较的同源物种。

打的肽指纹谱

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2015-04-20 09:12:14
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
那能不能多找上几段，设计引物扩增中间片段，再用RACE获得全长。
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4楼2015-04-20 10:39:48
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