| 查看: 882 | 回复: 6 | ||
[求助]
pcr扩增基因及测序相关问题的求助 急！！！ 已有2人参与
|
|
我正在扩增一个2808bp的基因 因为完整序列很难一次扩出 我就分了三段去扩 其中中间一段为2000多bp 扩出来后连接T载体 挑单克隆测序 一直测不出有 相同序列的单克隆 已经测了20多个 都有碱基的不一样 后来我采用提高退火温度 增加扩增特异性的方法去扩 还是没测出相同序列的 之后又换了taq酶 一开始用 la taq 后来用的pfu 也没测出来 一直有较多碱基不同，我在ncbi上查了一下 这个基因有3个transcript variant 不知道是否是这个原因，现在一筹莫展 希望 哪位大神帮我指点迷津 我将感激不尽！！！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有84人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 有关测序问题，为什么送菌液不直接送PCR产物
已经有18人回复
- 求指导！要测序，长度为1500左右，是pcr产物直接测序好还是连接转化测序比较好？
已经有9人回复
- 根据参考文献的的引物和条件，怎么确定目的基因的大小，是什么原因
已经有6人回复
- 急急急，基因组PCR扩增，结果无目的条带，求助！！！
已经有4人回复
- 测序结果引物部分跟原本应该的序列相比少个碱基，是引物的问题还是连接过程中丢失？
已经有3人回复
- 基因组测序结果问题
已经有7人回复
- 我扩了某个物种的某个基因，测序结果比对后，我惊呆了
已经有9人回复
- 测序结果中不到引物
已经有5人回复
- 大片段PCR扩增求助
已经有23人回复
- PCR引物必须与目的基因片段的一小段序列互补吗？急！！！
已经有9人回复
- 测序结果不是我想要的片段！很急！！
已经有17人回复
- pcr测序结果分析
已经有15人回复
- 线粒体基因组控制区扩增
已经有5人回复
- PCR扩增出来的条带,与预计大小一致,测序居然什么都不是????
已经有4人回复
- 关于基因测序引物的设计
已经有7人回复
- ITS1和ITS4做样品体系中真菌菌株鉴定，为啥PCR产物竟然是2个条带？
已经有11人回复
- 用PCR扩增后的DNA如何测序？不能直接用PCR就知道是什么菌种之类的吧？
已经有6人回复
- 求助：PCR扩增片段测序结果引物中间多出150bp的片段
已经有5人回复
- 反转录后PCR无条带
已经有5人回复
- 求助！PCR扩增不出全长DNA序列怎么办？
已经有24人回复
- 【求助/交流】分类鉴定的时候，为什么pcr之后还要做TA克隆，转化，然后将序列测序呢？
已经有5人回复
- 【求助/交流】核基因 PCR产物直接测序，结果出现单个位点套峰，是否需要做克隆测序
已经有9人回复
- 【求助/交流】PCR产物测序出现杂峰过多的问题
已经有7人回复
781055707
木虫 (著名写手)
- 应助: 291 (大学生)
- 金币: 3118.2
- 散金: 46
- 红花: 19
- 帖子: 2030
- 在线: 579.3小时
- 虫号: 3046113
- 注册: 2014-03-13
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2015-04-13 20:45:15
3楼2015-04-16 13:47:21
781055707
木虫 (著名写手)
- 应助: 291 (大学生)
- 金币: 3118.2
- 散金: 46
- 红花: 19
- 帖子: 2030
- 在线: 579.3小时
- 虫号: 3046113
- 注册: 2014-03-13
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2015-04-16 15:06:55
5楼2015-04-16 18:42:16
甲方不怕乙方
木虫 (正式写手)
- 应助: 21 (小学生)
- 金币: 2733.5
- 散金: 2338
- 红花: 10
- 帖子: 460
- 在线: 125.6小时
- 虫号: 2132025
- 注册: 2012-11-17
- 性别: GG
- 专业: 水产生物营养与饲料学
6楼2015-04-16 19:08:25
781055707
木虫 (著名写手)
- 应助: 291 (大学生)
- 金币: 3118.2
- 散金: 46
- 红花: 19
- 帖子: 2030
- 在线: 579.3小时
- 虫号: 3046113
- 注册: 2014-03-13
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
7楼2015-04-17 07:49:13
