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dzdingo

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于cDNA电泳 已有2人参与

以前听说cDNA电泳会出现弥散的条带,今天闲来无事就拿自己的cDNA模版跑了个电泳看看,结果发现居然出现了一条很亮的条带。希望有高手能给解答一下,万分感谢!
最右边的四个条带是cDNA的,前俩是3‘RACE的模版(好像有点奢侈了),后俩是用oligo d(T)进行的反转

关于cDNA电泳
Dell User 2015-04-05 13hr 57min.jpg
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liubolin945

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-10-20 09:12:02
我用的SMART技术,3'race用的是锚定引物加特异引物,退火较高
...

那个试剂盒我买了,
gsp是不是要加尾的那个 ? 15bp
QQ:277046172
6楼2015-10-21 12:19:31
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查看全部 8 个回答

liubolin945

铁虫 (小有名气)

我也好想知道啊,我的 3race都是弥散,好烦心啊
QQ:277046172
2楼2015-10-18 19:33:08
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Neo2000

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liubolin945 at 2015-10-18 19:33:08
我也好想知道啊,我的 3race都是弥散,好烦心啊

只能说,设计能力没过关呗,继续努力

发自小木虫Android客户端
3楼2015-10-18 19:39:11
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liubolin945

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-10-18 19:39:11
只能说,设计能力没过关呗,继续努力
...

你好,你说的设计能力,是指引物没设计好?

是这样的,我是用兼并引物设计出来的一对儿引物,成功P出303bp,测序比对之后正确。
现在想做race,但是这303bp内很难再找到比这引物更合适的引物了,

现在就用takara试剂盒P出一部分的3‘端。但是用oligo dT就都是弥散条带了,而且位置比较固定。

我引物的TM是56,而Oligo dT 才46还是48了,老师让我用降落,可是我不知道怎么操作
谢谢
QQ:277046172
4楼2015-10-20 08:50:21
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