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dzdingo

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于cDNA电泳 已有2人参与

以前听说cDNA电泳会出现弥散的条带，今天闲来无事就拿自己的cDNA模版跑了个电泳看看，结果发现居然出现了一条很亮的条带。希望有高手能给解答一下，万分感谢！
最右边的四个条带是cDNA的，前俩是3‘RACE的模版（好像有点奢侈了），后俩是用oligo d(T)进行的反转

关于cDNA电泳
Dell User 2015-04-05 13hr 57min.jpg
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1楼 2015-04-05 14:34:27
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liubolin945

铁虫 (小有名气)
我也好想知道啊，我的 3race都是弥散，好烦心啊
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QQ：277046172
2楼2015-10-18 19:33:08
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Neo2000

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liubolin945 at 2015-10-18 19:33:08
我也好想知道啊，我的 3race都是弥散，好烦心啊

只能说，设计能力没过关呗，继续努力

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3楼2015-10-18 19:39:11
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liubolin945

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-10-18 19:39:11
只能说，设计能力没过关呗，继续努力
...

你好，你说的设计能力，是指引物没设计好？

是这样的，我是用兼并引物设计出来的一对儿引物，成功P出303bp，测序比对之后正确。
现在想做race，但是这303bp内很难再找到比这引物更合适的引物了，

现在就用takara试剂盒P出一部分的3‘端。但是用oligo dT就都是弥散条带了，而且位置比较固定。

我引物的TM是56，而Oligo dT 才46还是48了，老师让我用降落，可是我不知道怎么操作
谢谢
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QQ：277046172
4楼2015-10-20 08:50:21
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by liubolin945 at 2015-10-20 08:50:21
你好，你说的设计能力，是指引物没设计好？

是这样的，我是用兼并引物设计出来的一对儿引物，成功P出303bp，测序比对之后正确。
现在想做race，但是这303bp内很难再找到比这引物更合适的引物了，

现在就用t ...

我用的SMART技术，3'race用的是锚定引物加特异引物，退火较高

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5楼2015-10-20 09:12:02
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liubolin945

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-10-20 09:12:02
我用的SMART技术，3'race用的是锚定引物加特异引物，退火较高
...

那个试剂盒我买了，
gsp是不是要加尾的那个 ？ 15bp
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6楼2015-10-21 12:19:31
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by liubolin945 at 2015-10-21 12:19:31
那个试剂盒我买了，
gsp是不是要加尾的那个 ？ 15bp...

直接ta就行了，不用加那15bp

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7楼2015-10-21 12:21:19
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匿名

用户注销 (正式写手)
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8楼2015-10-21 13:37:25
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