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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » cDNA稀释10倍会出现结果逆转吗？？？？？？
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wmjqy

新虫 (初入文坛)

[交流] cDNA稀释10倍会出现结果逆转吗？？？？？？ 已有2人参与

各位大侠。我把cDNA稀释10倍之后，再做QPCR，做了4次结果都是诱导作用（预期为抑制作用），做Bolting结果是抑制作用（符合预期）。是不是稀释会出现结果相反的用？？如果不是稀释所引起的，那有哪些因素会造成Q-PCR和WB结果相反，怎么解释啊？？？谢谢！

[ Last edited by wmjqy on 2012-5-29 at 16:08 ]
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1楼 2012-05-21 19:29:44
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西瓜: 金币+2, 鼓励回帖帮忙~ 2012-05-22 08:28:00
嗯................
       这个本来就不算稀有的事吧 RNA转录水平和蛋白表达水平又不能等同起来，qPCR和WB结果基本我没见过放一起的 本来基因表达就很复杂 转录水平后修饰作用又不是很少见 所以觉得跟稀释什么的本来就没有关系 并且按老外们做qPCR的方法都是建议稀释原液以矫正加样误差的
       个人看法 若有说错请高手指点
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Let God do with it as He wills
2楼2012-05-21 23:45:41
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wmjqy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-05-21 23:45:41:
嗯................
       这个本来就不算稀有的事吧 RNA转录水平和蛋白表达水平又不能等同起来，qPCR和WB结果基本我没见过放一起的 本来基因表达就很复杂 转录水平后修饰作用又不是很少见 所以觉得跟稀释什么的本

谢谢你，高手！。希望其他各位高手不吝赐教。
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3楼2012-05-21 23:50:01
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heroyl

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
个人觉得若果是同样稀释的话应该不会出现问题，这个应该没有关系的。
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实验虐我千百遍，我待实验如初恋
4楼2012-05-23 15:15:40
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wmjqy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-05-21 23:45:41
嗯................
       这个本来就不算稀有的事吧 RNA转录水平和蛋白表达水平又不能等同起来，qPCR和WB结果基本我没见过放一起的 本来基因表达就很复杂 转录水平后修饰作用又不是很少见 所以觉得跟稀释什么的本 ...

真奇怪了。用原液cDNA做RT-PCR时是抑制作用，但是把原液cDNA稀释10倍后却变成了诱导作用。起了怪了，是什么原因啊？？？求各位大侠赐教
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5楼2012-05-29 16:07:55
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