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wmjqy

新虫 (初入文坛)

[交流] cDNA稀释10倍会出现结果逆转吗?????? 已有2人参与

各位大侠。我把cDNA稀释10倍之后,再做QPCR,做了4次结果都是诱导作用(预期为抑制作用),做Bolting结果是抑制作用(符合预期)。是不是稀释会出现结果相反的用??如果不是稀释所引起的,那有哪些因素会造成Q-PCR和WB结果相反,怎么解释啊???谢谢!

[ Last edited by wmjqy on 2012-5-29 at 16:08 ]
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西瓜: 金币+2, 鼓励回帖帮忙~ 2012-05-22 08:28:00
嗯................
       这个本来就不算稀有的事吧 RNA转录水平和蛋白表达水平又不能等同起来,qPCR和WB结果基本我没见过放一起的 本来基因表达就很复杂 转录水平后修饰作用又不是很少见 所以觉得跟稀释什么的本来就没有关系 并且按老外们做qPCR的方法都是建议稀释原液以矫正加样误差的
       个人看法 若有说错请高手指点
Let God do with it as He wills
2楼2012-05-21 23:45:41
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wmjqy

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-05-21 23:45:41:
嗯................
       这个本来就不算稀有的事吧 RNA转录水平和蛋白表达水平又不能等同起来,qPCR和WB结果基本我没见过放一起的 本来基因表达就很复杂 转录水平后修饰作用又不是很少见 所以觉得跟稀释什么的本

谢谢你,高手!。希望其他各位高手不吝赐教。
3楼2012-05-21 23:50:01
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heroyl

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
个人觉得若果是同样稀释的话应该不会出现问题,这个应该没有关系的。
实验虐我千百遍,我待实验如初恋
4楼2012-05-23 15:15:40
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wmjqy

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-05-21 23:45:41
嗯................
       这个本来就不算稀有的事吧 RNA转录水平和蛋白表达水平又不能等同起来,qPCR和WB结果基本我没见过放一起的 本来基因表达就很复杂 转录水平后修饰作用又不是很少见 所以觉得跟稀释什么的本 ...

真奇怪了。用原液cDNA做RT-PCR时是抑制作用,但是把原液cDNA稀释10倍后却变成了诱导作用。起了怪了,是什么原因啊???求各位大侠赐教
5楼2012-05-29 16:07:55
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