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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 在线等 cDNA室温放置多久会降解
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大风吹

银虫 (小有名气)

[求助] 在线等 cDNA室温放置多久会降解

我做的逆转最后4度只设了一个小时，程序结束后样品就那样在机子里待着有四个小时左右，这样的cDNA还能继续做real-time吗，急求有经验的大侠指教
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1楼 2012-05-05 09:12:19
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大风吹

银虫 (小有名气)
就等于说我的cDNA在接近37度的情况下 放置了4个小时 还能用吗
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2楼2012-05-05 11:06:15
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cheng_xiao

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
能用，问题不大，我觉得，因为Real-timePCR是中间一段被扩增，两端降解一点没关系，再说分析数据是比值的比较
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我努力我奋斗我成功
3楼2012-05-05 13:17:19
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卷舒_ray

金虫 (小有名气)
来学习的。还有其他意见吗？
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4楼2012-05-05 17:28:20
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孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
大风吹: 金币+15, ★★★很有帮助 2012-06-05 08:48:02
我曾经将cDNA放冰盒里，由于室温高，一夜后冰化了，然后发现cDNA就没有产物了
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5楼2012-05-05 18:29:30
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freerain

禁虫 (职业作家)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-04 13:35:54
本帖内容被屏蔽
6楼2012-05-05 18:38:58
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红色日历

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by freerain at 2012-05-05 18:38:58
可以放心
逆转录之后的cDNA比RNA稳定得多，

况且你的情况也不等于说我的cDNA在接近37度的情况下 放置了4个小时 ，
PCR仪从4°到室温也要一定时间的，你们的室温现在也达不到37度。

real-time做的是定量，不 ...

要是放置了18个小时呢？4℃反应条件，还能做实时定量吗？急等！谢谢
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7楼2012-06-04 06:51:57
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szylnl

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

cDNA也是DNA啊，比较稳定的。
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用百分之百的努力去做每件事
8楼2012-06-04 10:08:16
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