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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】RNA逆转录成cDNA后如何鉴定
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dongfangzz

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】RNA逆转录成cDNA后如何鉴定 已有3人参与

RNA逆转录成cDNA后需要鉴定下（逆转录时的引物是随机引物和oligo），
一般是用cDNA跑电泳呢，还是以cDNA为模板PCR之后再跑电泳？
电泳后是不是两者条带的位置不太一样呀？因为PCR之后为双链DNA，碱基数比cDNA多。

[ Last edited by dongfangzz on 2010-9-11 at 16:33 ]
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1楼 2010-09-11 11:21:23
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sdqzsdqz

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
电泳后是不是两者条带的位置不太一样呀？因为PCR之后为双链DNA，碱基数比cDNA多
你说的很对啊。
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2楼2010-09-11 11:31:44
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dongfangzz

银虫 (小有名气)
那我怎么鉴定PCR之后的产物是不是我想要的呀？
因为要做荧光定量PCR,合成引物时是以mRNA序列为参考合成的，理论上产物是170bp。
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3楼2010-09-11 16:31:29
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bigboy123

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
原因是这样的，逆转录是非特异性的，PCR是特异性的，所以带不一样。
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供应PCR增量剂
4楼2010-09-12 09:50:34
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