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dongfangzz

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】RNA逆转录成cDNA后如何鉴定已有3人参与

RNA逆转录成cDNA后需要鉴定下(逆转录时的引物是随机引物和oligo),
一般是用cDNA跑电泳呢,还是以cDNA为模板PCR之后再跑电泳?
电泳后是不是两者条带的位置不太一样呀?因为PCR之后为双链DNA,碱基数比cDNA多。

[ Last edited by dongfangzz on 2010-9-11 at 16:33 ]
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sdqzsdqz

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
电泳后是不是两者条带的位置不太一样呀?因为PCR之后为双链DNA,碱基数比cDNA多
你说的很对啊。
2楼2010-09-11 11:31:44
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dongfangzz

银虫 (小有名气)

那我怎么鉴定PCR之后的产物是不是我想要的呀?
因为要做荧光定量PCR,合成引物时是以mRNA序列为参考合成的,理论上产物是170bp。
3楼2010-09-11 16:31:29
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bigboy123

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
原因是这样的,逆转录是非特异性的,PCR是特异性的,所以带不一样。
供应PCR增量剂
4楼2010-09-12 09:50:34
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