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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » QPCR内参和样品的Cp值低于多少不可行
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陈青chenqing

铜虫 (初入文坛)

[求助] QPCR内参和样品的Cp值低于多少不可行 已有2人参与

做相对定量QPCR内参和样品的Cp值低于多少不可行啊？为什么我经常做的都是25以上，甚至超过30，这样的结果是不是就不可行了啊
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自己的未来自己创造！
1楼 2015-03-22 21:46:15
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木木1995虫虫

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-03-23 11:27:09
是Ct值吧？扩增次数越多，越有可能有非特异性产物。所以我们常规的PCR都是30个。q-PCR，本身就对引物的设计要求较高，并且为了更宽范围的定量，就放到40个。如果你确定你的产物没有非特异性扩增（主要看溶解曲线或者跑胶结果），那么40个也是准的。Ct值不是一个固定的标准，还是要看溶解曲线的
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2楼2015-03-23 10:17:51
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懒蛋

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-03-23 11:27:12
Cp=Cq=Ct.

Cq的可接受范围跟仪器也有关系，但多数在18-30内为好。内参的Cq 范围18-22为好。若是25或以上，你的目的基因的Cq估计到30去了~（我说的是cycle=40情况下）。
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向钱看，向厚赚
3楼2015-03-23 10:26:22
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