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蛋白表达纯化问题
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flll2014
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蛋白表达纯化问题
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去年做的原核表达,成功构建了表达菌株,诱导表达量很高,纯化效果也较好,就保了菌种,今年直接将菌种活化了,也做pcr鉴定了,再诱导表达怎么表达量变得很低,不知道为什么,而且纯化也没纯化出来,请大家帮帮忙,谢谢!
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2015-03-12 12:45:22
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菌株退化了,可涂抗性版挑几个单克隆再表达,如都较低,再重新构建载体转化。
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3楼
2015-03-12 15:14:37
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重新转质粒,挑选单克隆,从头再做一遍表达纯化
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行至水穷处,坐看云起时
2楼
2015-03-12 14:31:46
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lomis
at 2015-03-12 15:14:37
菌株退化了,可涂抗性版挑几个单克隆再表达,如都较低,再重新构建载体转化。
原先构建的载体质粒也保存了,重新转化会不会好些
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4楼
2015-03-12 16:20:02
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Originally posted by
pennchem
at 2015-03-12 14:31:46
重新转质粒,挑选单克隆,从头再做一遍表达纯化
好的,谢谢
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5楼
2015-03-12 16:21:51
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