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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白在表达纯化处理的过程中起沫会有什么影响？
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简单HE认真

木虫 (小有名气)

[求助] 蛋白在表达纯化处理的过程中起沫会有什么影响？

在蛋白表达纯化过程中，经常会遇到起沫的现象（如菌体超声、可溶性表达的蛋白震荡，涡旋、包涵体表达的蛋白溶解等），会对蛋白的抗原性或者是纯化的难易程度有影响吗，会有哪些影响呢？请教高手赐教，谢谢！
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简单做人，认真做事。
1楼 2012-11-29 20:32:04
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2012-11-30 10:45:02
简单HE认真: 金币+3, ★有帮助 2012-11-30 19:08:41
起沫的话容易导致蛋白质变性或者沉淀，如果可以的话尽量避免吧（这个还看蛋白质的性质，我师兄的蛋白强悍，起沫也不怕）~
不过在菌体涡旋时起沫倒是没啥问题因为没有直接接触蛋白
话说超声的时候应该起沫也不多啊，是不是探头位置没放对哦？
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2楼2012-11-29 20:43:59
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
简单HE认真: 金币+2, ★有帮助 2012-12-01 21:27:57
蛋白样品起沫肯定不好，机械作用太强导致蛋白变性。不过，变性蛋白的抗原性会增强。如果你只是想用它做抗体的话，应该没什么事。超声破碎菌本身是不会引起蛋白变性的，样品蛋白应该是活性形式，整个过程应该不起沫。象2L说的，检查下探头位置。
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3楼2012-11-30 07:05:05
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yxncas-2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般起沫了，蛋白质可能会变性，特别是一些活性比较脆弱的蛋白，所以在操作过程中尽量温柔一些，像对待女朋友那般温柔，这样的现象可能就会好很多！
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4楼2012-12-01 16:11:35
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简单HE认真

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-30 07:05:05
蛋白样品起沫肯定不好，机械作用太强导致蛋白变性。不过，变性蛋白的抗原性会增强。如果你只是想用它做抗体的话，应该没什么事。超声破碎菌本身是不会引起蛋白变性的，样品蛋白应该是活性形式，整个过程应该不起沫。 ...

为什么变性蛋白的抗原性会增强？
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简单做人，认真做事。
5楼2012-12-01 21:29:24
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 简单HE认真 at 2012-12-01 21:29:24
为什么变性蛋白的抗原性会增强？...

虽然说一般蛋白抗原性都是取决于位于表面的氨基酸残基，所以活性蛋白可以直接免疫动物做抗体。但变性后蛋白的氨基酸残基暴露得更充分，所以抗原性会比活性蛋白要强。
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6楼2012-12-02 03:33:01
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