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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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简单HE认真

木虫 (小有名气)

[求助] 蛋白在表达纯化处理的过程中起沫会有什么影响?

在蛋白表达纯化过程中,经常会遇到起沫的现象(如菌体超声、可溶性表达的蛋白震荡,涡旋、包涵体表达的蛋白溶解等),会对蛋白的抗原性或者是纯化的难易程度有影响吗,会有哪些影响呢?请教高手赐教,谢谢!
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简单做人,认真做事。
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 简单HE认真 at 2012-12-01 21:29:24
为什么变性蛋白的抗原性会增强?...

虽然说一般蛋白抗原性都是取决于位于表面的氨基酸残基,所以活性蛋白可以直接免疫动物做抗体。但变性后蛋白的氨基酸残基暴露得更充分,所以抗原性会比活性蛋白要强。
6楼2012-12-02 03:33:01
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查看全部 6 个回答

weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2012-11-30 10:45:02
简单HE认真: 金币+3, 有帮助 2012-11-30 19:08:41
起沫的话容易导致蛋白质变性或者沉淀,如果可以的话尽量避免吧(这个还看蛋白质的性质,我师兄的蛋白强悍,起沫也不怕)~
不过在菌体涡旋时起沫倒是没啥问题因为没有直接接触蛋白
话说超声的时候应该起沫也不多啊,是不是探头位置没放对哦?
2楼2012-11-29 20:43:59
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
简单HE认真: 金币+2, 有帮助 2012-12-01 21:27:57
蛋白样品起沫肯定不好,机械作用太强导致蛋白变性。不过,变性蛋白的抗原性会增强。如果你只是想用它做抗体的话,应该没什么事。超声破碎菌本身是不会引起蛋白变性的,样品蛋白应该是活性形式,整个过程应该不起沫。象2L说的,检查下探头位置。
3楼2012-11-30 07:05:05
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yxncas-2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般起沫了,蛋白质可能会变性,特别是一些活性比较脆弱的蛋白,所以在操作过程中尽量温柔一些,像对待女朋友那般温柔,这样的现象可能就会好很多!
4楼2012-12-01 16:11:35
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