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flll2014

铜虫 (小有名气)

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专业: 动物遗传学

[交流] 蛋白表达纯化问题已有5人参与

去年做的原核表达，成功构建了表达菌株，诱导表达量很高，纯化效果也较好，就保了菌种，今年直接将菌种活化了，也做pcr鉴定了，再诱导表达怎么表达量变得很低，不知道为什么，而且纯化也没纯化出来，请大家帮帮忙，谢谢！

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1楼 2015-03-12 12:45:22

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lixiancai

新虫 (初入文坛)

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★
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引用回帖:

6楼: Originally posted by 九字江山 at 2015-03-13 15:44:31
你的保种菌是什么菌？以前我做蛋白表达纯化时也曾出现类似问题：原来是可溶表达，保存后活化再表达却是包涵体。给你以下几个意见：
1. 你酶切鉴定的质粒是你未表达的菌液里提出的吗？
2. 你可以再次划板，挑取阳性 ...

什么是溶性表达和包涵体

[ 发自小木虫客户端 ]