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jinfangli

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也做过类似的质粒构建:根据我当时的过程,可能你的问题在于
1、在两个大片段连接时要保证两个片段的酶切点一致(尽可能二次酶切提纯);
2、连接酶选取高效连接酶,体系根据片段大小调整,尽可能单位体系中1:1;
3、转化活化过程延长;
4、摇床高温消毒;
问题估计出在酶切连接上了,这部分解决了后面应该不是问题。
fight
2楼2015-03-09 11:09:16
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