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spirit_free金虫 (小有名气)
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[求助]
PBI121 与目的片段连接后转入DH5α，长出的菌落提取质粒都是空载，求原因 已有3人参与
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| 我是将PBI121载体与目的片段分别双酶切后电泳，切胶回收，再做连接的。PBI121双酶切是切去GUS基因（约1.8kb），要连接的目的片段是113bp，用连接后的产物转化DH5α，挑取得到的菌落，摇菌提质粒，得到的质粒是含有GUS基因的PBI121，而不是我预期的到的pbi121与目的片段的连接产物。求各位帮忙分析原因。另外求教怎样提高PBI121与目标片段的连接成功率，是不是我的目标片段太小了因此与PBI121连接比较困难。 |
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