| 查看: 4301 | 回复: 5 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
spirit_free金虫 (小有名气)
|
[求助]
PBI121 与目的片段连接后转入DH5α，长出的菌落提取质粒都是空载，求原因 已有3人参与
|
|
| 我是将PBI121载体与目的片段分别双酶切后电泳，切胶回收，再做连接的。PBI121双酶切是切去GUS基因（约1.8kb），要连接的目的片段是113bp，用连接后的产物转化DH5α，挑取得到的菌落，摇菌提质粒，得到的质粒是含有GUS基因的PBI121，而不是我预期的到的pbi121与目的片段的连接产物。求各位帮忙分析原因。另外求教怎样提高PBI121与目标片段的连接成功率，是不是我的目标片段太小了因此与PBI121连接比较困难。 |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
风随心动» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有185人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- DH5α转化后 提取质粒提取不出来
已经有23人回复
- 关于目的基因与载体连接后转化感受态细胞提取质粒的问题。
已经有8人回复
- PBI121载体与目的片段连接后双酶切问题
已经有23人回复
- 酶切连接连不上，要死了
已经有23人回复
- 求帮助！基因连接克隆载体后转化大肠杆菌，两天了都没长出菌。。。
已经有10人回复
- 大肠杆菌培养 质粒提取后困惑
已经有16人回复
- 目的片段和载体连接一直不上
已经有24人回复
- 两个质粒同时转大肠DH5α
已经有3人回复
- 重组质粒构建 连接转化效率低 求帮助啊
已经有19人回复
- 纠结的分子实验，双酶切连不上，求助
已经有14人回复
- 转化感受态后提取质粒，测浓度总是很低
已经有17人回复
- pET28a双酶切后连接目的基因，什么也不长。。。
已经有23人回复
- 质粒快抽有条带，提取时却没有了，什么问题啊？
已经有15人回复
- 目的片段和pMD18-T simple vector 的连接
已经有20人回复
- 求助！大肠杆菌转化不长菌落~
已经有28人回复
- 目的片段与载体连接后无法检测出
已经有7人回复
- 载体连接pcr片段一直连不上
已经有17人回复
- 克隆基因和载体连接后转化至大肠杆菌，为什么每次涂板都是空平板没有菌落？
已经有17人回复
- 【求助/交流】连接产物转化后菌落PCR正确，提取的质粒却比空质粒还小？
已经有4人回复
- 【求助/交流】目的基因连接表达载体后涂板不长菌
已经有11人回复
guanhr515
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 115.3
- 散金: 10
- 帖子: 15
- 在线: 1.4小时
- 虫号: 4143321
- 注册: 2015-10-14
- 专业: 细胞信号转导
6楼2016-04-06 11:20:08
2楼2015-01-30 17:23:31
董博士
金虫 (正式写手)
- 应助: 155 (高中生)
- 金币: 3129.9
- 红花: 24
- 帖子: 312
- 在线: 96.2小时
- 虫号: 3524307
- 注册: 2014-11-07
- 专业: 医学图像数据处理与分析
3楼2015-02-01 11:00:29
4楼2015-02-01 23:59:15
