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spirit_free金虫 (小有名气)
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[求助]
PBI121 与目的片段连接后转入DH5α,长出的菌落提取质粒都是空载,求原因 已有3人参与
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| 我是将PBI121载体与目的片段分别双酶切后电泳,切胶回收,再做连接的。PBI121双酶切是切去GUS基因(约1.8kb),要连接的目的片段是113bp,用连接后的产物转化DH5α,挑取得到的菌落,摇菌提质粒,得到的质粒是含有GUS基因的PBI121,而不是我预期的到的pbi121与目的片段的连接产物。求各位帮忙分析原因。另外求教怎样提高PBI121与目标片段的连接成功率,是不是我的目标片段太小了因此与PBI121连接比较困难。 |
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2楼2015-01-30 17:23:31
董博士
金虫 (正式写手)
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guanhr515
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