【答案】应助回帖

» 猜你喜欢

为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种? 已经有5人回复
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》已经有3人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有166人回复
求助食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社电子版已经有5人回复
胶体几丁质的结晶度？已经有0人回复
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士已经有2人回复
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线已经有5人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

为什么PCR之后的电泳会出现这样的条带？图片不太清楚，左边三条是内参已经有9人回复
ISSR-PCR标记电泳图已经有6人回复
电泳图引物条带很亮，目的产物条带不亮已经有8人回复
请高手帮忙分析一下这个PCR产物凝胶电泳图已经有5人回复
PCR琼脂糖凝胶电泳图希望大家帮我分析一下已经有12人回复
跑PCR，琼脂糖电泳没有条带出现已经有14人回复
急！各位帮忙看看，PCR后跑的琼脂糖凝胶电泳图，条带不清晰原因是什么？已经有16人回复
PCR后电泳出现一片亮色，那些亮的东西是什么？已经有36人回复
PCR电泳图求解已经有13人回复
pcr扩增后的电泳图为什么是这个样子？该如何改进已经有16人回复
电泳时电泳槽内产生很多气泡是何原因，而且电泳完后电泳液温度比较高？已经有5人回复
双向电泳如何加入marker，是否控制温度已经有9人回复
这样的电泳图片是否代表PCR扩增成功了？已经有26人回复
rt-pcr电泳图，求好心虫友帮助分析一下，跪谢。。。已经有14人回复
急求RT-PCR电泳图分析已经有22人回复
ISSR电泳跑久条带才能分开？已经有7人回复
PCR电泳图怎么会这样？各位帮忙分析一下吧已经有12人回复
两种引物的PCR电泳图，做了多次还是不解已经有18人回复
我的PCR电泳图怎么这样的啊。。。已经有11人回复
issr的条带不清晰已经有5人回复
PCR后电泳条带异常已经有10人回复
大家帮忙分析一下PCR电泳图已经有14人回复
【求助/交流】ISSR引物扩增产物电泳图，求助各位高手~~~ 已经有10人回复
【求助/交流】PCR后的产物电泳电压多少合适？已经有10人回复

1楼2015-01-09 22:50:03

867575969

至尊木虫 (著名写手)

One Piece

应助: 42 (小学生)
金币: 12421.4
散金: 194
红花: 11
帖子: 1813
在线: 443.6小时
虫号: 1608309
注册: 2012-02-09
性别: GG
专业: 林木遗传育种学

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-11 15:37:33

你问的是每一条引物的最适温度还是三条引物共同的最适温度？确定最适温度只需看目的条带特异性如何，带清晰明亮，并且杂带较少，无弥散非特性条带即可！祝好！

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

yangqingxy

有些东西因为得不到而变得美好，有些东西因为拥有而变得弥足珍贵！

2楼2015-01-11 00:12:46

yangqingxy

铜虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 73.5
散金: 10
红花: 2
帖子: 242
在线: 135.8小时
虫号: 1288436
注册: 2011-05-07
专业: 植物生理与生化

送红花一朵

引用回帖:

2楼: Originally posted by 867575969 at 2015-01-11 00:12:46
你问的是每一条引物的最适温度还是三条引物共同的最适温度？确定最适温度只需看目的条带特异性如何，带清晰明亮，并且杂带较少，无弥散非特性条带即可！祝好！

我问的是每一条引物的最适温度是多少？知道引物，知道提的DNA的分子量和大小，怎么知道扩增的目的条带的大小呀？多谢回复，很想想您学习

3楼2015-01-11 22:01:30

867575969

至尊木虫 (著名写手)

One Piece

应助: 42 (小学生)
金币: 12421.4
散金: 194
红花: 11
帖子: 1813
在线: 443.6小时
虫号: 1608309
注册: 2012-02-09
性别: GG
专业: 林木遗传育种学

【答案】应助回帖

引用回帖:

3楼: Originally posted by yangqingxy at 2015-01-11 22:01:30
我问的是每一条引物的最适温度是多少？知道引物，知道提的DNA的分子量和大小，怎么知道扩增的目的条带的大小呀？多谢回复，很想想您学习...

你设计的引物肯定是针对某一特定序列的，根据marker已知的大小和目的条带的位置就知道其大小了，这些最基本的知识，你可以自己找相关书籍查阅就ok了！

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

yangqingxy

有些东西因为得不到而变得美好，有些东西因为拥有而变得弥足珍贵！

4楼2015-01-11 22:07:00

yangqingxy

铜虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 73.5
散金: 10
红花: 2
帖子: 242
在线: 135.8小时
虫号: 1288436
注册: 2011-05-07
专业: 植物生理与生化

送红花一朵

引用回帖:

4楼: Originally posted by 867575969 at 2015-01-11 22:07:00
你设计的引物肯定是针对某一特定序列的，根据marker已知的大小和目的条带的位置就知道其大小了，这些最基本的知识，你可以自己找相关书籍查阅就ok了！

...

引物没有设计，用的是UBC中的100条issr引物，现在在进行引物筛选，怎么知道扩增的目的条带大小呢？

5楼2015-01-12 07:59:37

867575969

至尊木虫 (著名写手)

One Piece

应助: 42 (小学生)
金币: 12421.4
散金: 194
红花: 11
帖子: 1813
在线: 443.6小时
虫号: 1608309
注册: 2012-02-09
性别: GG
专业: 林木遗传育种学

【答案】应助回帖

引用回帖:

5楼: Originally posted by yangqingxy at 2015-01-12 07:59:37
引物没有设计，用的是UBC中的100条issr引物，现在在进行引物筛选，怎么知道扩增的目的条带大小呢？...

目的条带是根据你实验目的来的，你筛选引物为了找寻特异性引物吧？你做的实验是做聚类分析，判段亲缘关系远近吗？

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

yangqingxy

有些东西因为得不到而变得美好，有些东西因为拥有而变得弥足珍贵！

6楼2015-01-12 17:26:03

yangqingxy

铜虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 73.5
散金: 10
红花: 2
帖子: 242
在线: 135.8小时
虫号: 1288436
注册: 2011-05-07
专业: 植物生理与生化

送红花一朵

引用回帖:

6楼: Originally posted by 867575969 at 2015-01-12 17:26:03
目的条带是根据你实验目的来的，你筛选引物为了找寻特异性引物吧？你做的实验是做聚类分析，判段亲缘关系远近吗？

...

是的，你说的很对，我想向您学习，我的PCR结果如上三图，如何判断每一个引物的退火温度，以及如何改进我的实验呢？多谢回复

7楼2015-01-12 20:22:23

867575969

至尊木虫 (著名写手)

One Piece

应助: 42 (小学生)
金币: 12421.4
散金: 194
红花: 11
帖子: 1813
在线: 443.6小时
虫号: 1608309
注册: 2012-02-09
性别: GG
专业: 林木遗传育种学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
yangqingxy: 金币+10, ★有帮助 2015-01-13 21:56:10

引用回帖:

7楼: Originally posted by yangqingxy at 2015-01-12 20:22:23
是的，你说的很对，我想向您学习，我的PCR结果如上三图，如何判断每一个引物的退火温度，以及如何改进我的实验呢？多谢回复...

这个很简单，根据你跑出来的图，只要看看条带的多少，明亮清晰度等，就可以知道该引物哪个温度合适了，一般简单点就是根据所给引物推荐的TM值上下加减几度来看所p的条带如何，以此来看该引物哪个温度合适！

有些东西因为得不到而变得美好，有些东西因为拥有而变得弥足珍贵！

8楼2015-01-12 22:05:05

蝶~恋花

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 2870.5
红花: 1
帖子: 62
在线: 41小时
虫号: 4121155
注册: 2015-10-06
专业: 中药资源

你好！ISSR的引物还可以靠单一引物来摸索退火温度吗？就是一对引物的其中一条？请问你最后的结果怎么样呢？

发自小木虫IOS客户端

9楼2017-03-18 18:34:54