应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR结果只有引物二聚体的条带，没有产物
71/1返回列表
查看: 4364  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

tingyue678

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR结果只有引物二聚体的条带，没有产物 已有5人参与

做PCR结果只有引物二聚体条带，没有产物，请教大神可能是什么原因造成的。我做的是酿酒酵母的基因组。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-01-08 20:01:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aotoulan

禁虫 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-09 19:30:42
本帖内容被屏蔽
2楼2015-01-08 21:26:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zliean

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-09 19:30:49
检查检查引物 看看pcr温度

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
3楼2015-01-09 02:14:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-09 19:30:58
您好，很高兴
结果只有引物二聚体，但是没有产物，至少引物之间还能合成双链说明引物是没问题的，
那么原因可能有
1）模板降解了，没有模板无法合成双链 ，所以你得确定你的模板有没有降解，重新提取模板再操作一遍
2）酶的特异性太差了，室温下，酶活性未被彻底封闭，酶还是有活性的，所以指导了引物与引物结合，在温度升到95℃变性的时候，却没有引物和模板配对，也无法扩增出产物的。如果使用的是普通Taq酶的话，可能是操作上慢了些，或是没有在低温下进行操作，如果都有的话，那就是酶的性能太差，所以要找一种室温下酶活性完全封闭的酶，建议换成热启动Taq酶，我扩增结束后没有二聚体也没有非特异性产物，市场上有很多卖的，可以找点便宜的。最好找化学修饰的，封闭更彻底，而且无动物性DNA污染。
我的推荐：http://cn.promega.com（效果好，价格贵的）
http://www.detaibio.com/relia-hotstart-polymerase.html（效果也不错，价格适中）
还有TAKARA（它的网站正在改版，目前还没有信息 ）
呵呵 希望对你有所帮助哦
赞一下(2人) 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
4楼2015-01-09 10:16:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xmclql

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-09 19:31:07
我们也是做S. cerevisiae的，类似的问题也遇到过。DNA模板质量很重要，如果可以使用kit提取纯化，PCR延伸时间可以尝试稍微放长一点。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2015-01-09 17:28:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

曼舞流苏

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我第一反应是你PCR条件木有控制好，温度什么的不合适，这个需要多做几次摸索一下的，可以设置个温度梯度试试。。
赞一下 回复此楼
6楼2015-01-12 11:02:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

15694412860

新虫 (初入文坛)
请问您怎么解决的，我也遇到了一样的问题

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
powerful
7楼2017-05-12 16:40:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tingyue678 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 深圳大学硕士招生（2026秋，传感器方向，仅录取第一志愿） +4 xujiaoszu 2026-03-11 9/450 2026-03-17 10:29 by xujiaoszu
[考研] 材料专硕274一志愿陕西师范大学求调剂 +5 薛云鹏 2026-03-13 5/250 2026-03-17 10:15 by Sammy2
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +15 不知道叫什么！ 2026-03-15 17/850 2026-03-17 10:13 by Sammy2
[考研] 304求调剂 +7 小熊joy 2026-03-14 7/350 2026-03-17 08:53 by 雾散后相遇lc
[考研] 考研化学学硕调剂，一志愿985 +3 张vvvv 2026-03-15 5/250 2026-03-16 20:25 by 张vvvv
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:58 by 漾漾123sun
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +13 enenenhui 2026-03-13 14/700 2026-03-16 15:19 by 了了了了。。
[考研] 344求调剂 +3 knight344 2026-03-16 3/150 2026-03-16 09:42 by 无际的草原
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 341求调剂 +3 番茄头--- 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:07 by JourneyLucky
[考研] 285 求调剂 资源与环境 一志愿北京化工大学 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:04 by JourneyLucky
[考研] 0703，333分求调剂 一志愿郑州大学-物理化学 +3 李魔女斗篷 2026-03-11 3/150 2026-03-13 22:24 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-12 5/250 2026-03-13 18:31 by ms629
[考研] 考研调剂 +4 芬达46 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:04 by ruiyingmiao
[考研] 283求调剂，材料、化工皆可 +8 苏打水7777 2026-03-11 10/500 2026-03-13 09:06 by Linda Hu
[考研] 321求调剂（食品/专硕） +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
[考研] 420求调剂 +4 莫向外求11 2026-03-10 6/300 2026-03-12 14:41 by ruiyingmiao
[考研] 290求调剂 +3 柯淮然 2026-03-10 8/400 2026-03-11 13:48 by 柯淮然
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭