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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR中引物终浓度是多少
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twisty

木虫 (正式写手)

newer

[求助] PCR中引物终浓度是多少

刚从公司订了引物回来，说明书上写的也很清楚了，但不知PCR时引物终浓度一般是多少？新手请勿嫌币子少。
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1楼 2012-04-03 17:59:13
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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twisty: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-04-04 17:52:25
一般来说每条引物浓度在0.1-0.5微摩尔每升，就可以满足30个循环的反应。更具体信息的你可以参考使用PCR酶系统说明书，有的会提供推荐的最佳体系组成浓度。
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2012-04-03 18:15:09
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孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般0.4就好了，引物浓度高了容易得到二聚体
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3楼2012-04-03 22:01:33
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yjb3344

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我一般是按照OD值配母液
配好的母液10ul 加80ul水作为终液
效果很好嘞
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不论在世界的任何角落·都要感到幸福
4楼2012-04-04 14:34:32
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yjb3344

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

忘了说了 PCR的时候 引物一般加0.6ul
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不论在世界的任何角落·都要感到幸福
5楼2012-04-04 14:35:22
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zhoujiang09

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励新虫交流 2012-04-05 18:30:13
我加的0.4，没有二聚体
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6楼2012-04-04 14:39:00
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love_st

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
说终浓度吧，一般200-400nM之间
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7楼2012-04-04 16:23:42
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twisty

木虫 (正式写手)

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感谢各位参与。
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8楼2012-04-04 17:52:49
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zx6291

铜虫 (小有名气)
引物一般配成10uM ，50 ul PCR体系加入2ul就可以了
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9楼2012-04-05 10:32:44
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可帅儿

银虫 (正式写手)
我是先稀释成10uM，然后反应体系里加1ul效果比较好（50ul体系）
之前是50ul体系里各加4ul，最后结果不堪设想
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追随自己的心！不要做让自己后悔的事！
10楼2012-04-05 13:39:58
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