版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

tianti_121

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 321.3
散金: 3
帖子: 165
在线: 55.1小时
虫号: 1526483
注册: 2011-12-06
专业: 微生物学

[求助] PCR条带淡，怎样优化？（如图）已有12人参与

菌液PCR，反应体系：菌液0.5，引物各1，Fastpfu buffer 5，dNTP 2.5，Fastpfu酶 0.5，ddH2O 14.5，共25微升。

PCR程序：94℃ 4min，
               94℃ 30s
               62℃ 30s
               72℃ 2min
               35个循环
               72℃  10min

目的基因大概1300多bp.

求优化条件！十分感谢！

PCR条带淡，怎样优化？（如图）

高保真菌液PCR.jpg

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

ＰＣＲ产物跑电泳，随着跑电泳时间的增加，，条带会下移，最后竟然消失了，怎么回事呀已经有25人回复
PCR后可以看到目的条带，但为什么目的条带上方有弥散？已经有8人回复
求PCR条件优化已经有8人回复
电泳图引物条带很亮，目的产物条带不亮已经有8人回复
PCR后跑胶没有任何条带已经有49人回复
PCR 扩增条带大小不对已经有10人回复
PCR优化问题求助已经有19人回复
跑PCR，琼脂糖电泳没有条带出现已经有14人回复
如何减少引物二聚体已经有21人回复
pcr跑胶，结果目的条带很糊，看不清东西，mark很清楚，目的条带的地方一片胡已经有5人回复
求助~~~~~PCR产物条带分析已经有15人回复
pcr目的条带暗，怎么办呢？？已经有25人回复
RT—PCR引物、条带问题，新手求助，求意见，求建议！已经有9人回复
求解PCR问题《忘记加水的前后》已经有13人回复
短片段PCR扩增已经有7人回复
电泳条带很淡，能用于割胶回收吗已经有7人回复
能不能只用一条引物做不对称PCR？已经有11人回复
PCR退火温度态度会导致扩增不出目的条带么？已经有4人回复
相同条件的pcr产物，跑出不同的条带，是什么原因[/img][/img][/img] 已经有12人回复
降落PCR和梯度PCR 已经有3人回复
PCR产物不到200bp条带模糊已经有10人回复
【求助/交流】请教PCR条件优化已经有9人回复
【求助/交流】PCR后电泳出现两条带是怎么回事？已经有10人回复
【求助/交流】（5.20更新）PCR产物电泳没有条带，why? 已经有20人回复
【求助/交流】PCR条带不清楚已经有11人回复

1楼 2014-12-28 11:18:35

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

王平阳

金虫 (正式写手)

MolEPI: 2
应助: 124 (高中生)
金币: 968.1
散金: 30
红花: 30
帖子: 413
在线: 105.5小时
虫号: 1222296
注册: 2011-03-05
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-28 23:06:16

退火温度不用变，延伸时间要缩短（建议延伸50 s — 1 min即可），循环次数可以增加（30 — 35个循环）。另外，就你图上这个量做后续实验也够了啊。

没有做不到，只有想不到！

8楼2014-12-28 14:26:59

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主 tianti_121 的主题更新