24小时热门版块排行榜    

查看: 1644  |  回复: 3

qincaiyan615

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教各位,xho 1和sal 1双酶切重组质粒,切不开, 已有2人参与

请教各位,xho 1和sal 1双酶切重组克隆载体,切下来目的条带,再往真核表达载体上连,根据测序结果是没连上,但是菌液PCR鉴定,目的条带P的很亮,如果没连到表达载体上的话,怎么能P 出来呢?后来知道他俩是同尾酶,这种情况该怎么办啊?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

世外清风

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
qincaiyan615(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-26 10:20:37
根据测序结果比对一下,看看连的情况,是否为错连了还是什么其他情况。
2楼2014-11-25 15:14:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cxy8023

银虫 (初入文坛)

换一个酶
路漫漫其修远兮吾将上下而求索
3楼2015-12-06 17:16:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wjasaa

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

菌液PCR是可能得到假阳性的,原因会来自引物错配,反应体系污染,或者目标插入序列和空载体本身插入序列相似等。T4连接效率比较低,加上你这两个酶是同尾酶,用该方案几乎得不到阳性克隆。可以考虑换酶切位点,或者改用其他连接方式,具体你可以私信聊。
WWW.ABMGOOD.COM
4楼2015-12-07 11:17:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 qincaiyan615 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今年也是没消息就是没中么 +4 vito刘 2026-06-13 7/350 2026-06-14 10:31 by vito刘
[论文投稿] 买卖文章的刷屏了! +3 能丫 2026-06-13 3/150 2026-06-14 09:20 by bobvan
[找工作] *囍 +4 m584r2z4j3 2026-06-12 4/200 2026-06-14 09:06 by 8bmv3h4hvh
[硕博家园] T^T +7 m584r2z4j3 2026-06-11 8/400 2026-06-14 08:34 by 8bmv3h4hvh
[公派出国] T^T +6 q1zg6x4lf3 2026-06-12 6/300 2026-06-14 08:28 by 8bmv3h4hvh
[考博] →_→ +4 q1zg6x4lf3 2026-06-12 4/200 2026-06-14 08:28 by 8bmv3h4hvh
[考研] O(∩_∩)O +4 q1zg6x4lf3 2026-06-12 5/250 2026-06-14 08:23 by 8bmv3h4hvh
[硕博家园] O(∩_∩)O +6 jk31rb6vyz 2026-06-12 8/400 2026-06-14 08:10 by 8bmv3h4hvh
[考博] T^T +4 m584r2z4j3 2026-06-11 4/200 2026-06-14 08:08 by 8bmv3h4hvh
[公派出国] π_π +5 m584r2z4j3 2026-06-11 5/250 2026-06-14 08:08 by 8bmv3h4hvh
[公派出国] +4 q1zg6x4lf3 2026-06-12 4/200 2026-06-13 19:05 by 1js5n6upxm
[考研] T^T +6 m584r2z4j3 2026-06-11 6/300 2026-06-13 18:29 by lkmi35jdzt
[考博] π_π +4 m584r2z4j3 2026-06-11 4/200 2026-06-13 18:25 by lkmi35jdzt
[找工作] 售SCI文章,我:8.O.5.51O.5.4,科目齐全,可十急 +4 q1zg6x4lf3 2026-06-12 4/200 2026-06-13 08:53 by t4hz8376wy
[论文投稿] →_→ +5 m584r2z4j3 2026-06-11 5/250 2026-06-13 08:13 by t4hz8376wy
[基金申请] 面上项目没有好文章就没希望了吗? +19 1234567wang 2026-06-07 21/1050 2026-06-12 21:24 by littlezl
[考博] [急招]吉林大学招收26年9月入学考核制博士生1名,截止今晚24点前 +3 hehejin 2026-06-10 4/200 2026-06-12 18:24 by 冻雨天
[基金申请] 前几天时间戳更新了 +8 vito刘 2026-06-11 13/650 2026-06-12 14:17 by BlakeReary
[教师之家] AASSDDFF +3 m584r2z4j3 2026-06-11 3/150 2026-06-12 11:28 by zs48m4lz8g
[考博] 还有课题组有博士名额吗 +5 冻雨天 2026-06-07 6/300 2026-06-08 20:59 by RCS_tyro
信息提示
请填处理意见